稳定、干燥的轮状病毒疫苗、其组合物和制备其的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102202688A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102202688A(43)申请公布日2011.09.28(21)申请号200980125578.7(51)Int.Cl.(22)申请日2009.11.06A61K39/15(2006.01)(30)优先权数据2365/MUM/20082008.11.07IN(85)PCT申请进入国家阶段日2010.12.31(86)PCT申请的申请数据PCT/IN2009/0006292009.11.06(87)PCT申请的公布数据WO2010/146598EN2010.12.23(71)申请人印度血清研究所有限公司地址印度浦那(72)发明人R·M·德赫雷S·S·皮萨尔J·K·扎德(74)专利代理机构中国专利代理(香港)有限公司72001代理人马崇德郭文洁权利要求书2页说明书8页(54)发明名称稳定、干燥的轮状病毒疫苗、其组合物和制备其的方法(57)摘要本发明提供了新的冷冻干燥轮状病毒疫苗制剂和它们的制备方法。该制剂包括疫苗稳定剂，其导致疫苗制剂的稳定性提高，并使其效能损失最小。该轮状病毒疫苗制剂包括二糖(例如蔗糖)与氨基酸(例如甘氨酸)的有利的比例。冷冻干燥导致病毒制剂具有100%病毒保存性能，并且残余水份为大约0.8%至1.4%。CN10268ACCNN110220268802202694A权利要求书1/2页1.冷冻干燥的轮状病毒疫苗制剂，包括∶a)大约1至大约1000×105pfu/mL的至少一个轮状病毒菌株；b)大约2至大约20%(w/v)的糖；c)大约2至大约20%(w/v)的至少一种氨基酸。2.按照权利要求1的组合物，其中所述轮状病毒在37℃储存15个月之后，保持其效能的大约100%。3.按照权利要求1的组合物，其中所述轮状病毒在25℃储存6个月之后，保持其效能的大约100%。4.按照权利要求1的组合物，其中所述轮状病毒在2至8℃储存6个月之后，保持其效能的大约100%。5.权利要求1的疫苗，其中以生物学有效浓度加入细胞培养基。6.权利要求5的疫苗，其中所述细胞培养基是最小必需培养基。7.按照权利要求1的制剂，其中所述至少一种糖选自一组蔗糖，甘露糖醇，海藻糖，麦芽糖，乳糖，山梨糖醇，葡萄糖和岩藻糖。8.按照权利要求1的制剂，其中所述至少一种氨基酸选自一组亮氨酸，异亮氨酸，组氨酸，甘氨酸，谷氨酰胺，精氨酸和丙氨酸。9.按照权利要求1的制剂，其中一旦与稀释剂进行重组，pH值在大约pH5.5至大约pH7.5之间。10.权利要求1的制剂，包括a)大约5%(w/v)的蔗糖；b)大约5%(w/v)的甘氨酸。11.制备按照权利要求1的稳定轮状病毒疫苗制剂的方法，包括∶a)在额外含有谷氨酰胺和碳酸氢钠的MEM中培养轮状病毒；b)制备稳定剂，该稳定剂含有大约0.5:1至大约1:5比例的蔗糖和甘氨酸；c)将病毒和稳定剂以大约1.5:1的比例混合；d)将稳定剂和病毒的混合物冷冻干燥大约30小时至60小时，产生疫苗的冷冻干燥形式，其残留含水量为大约0.8%至大约1.4%。12.权利要求11的制剂，其中蔗糖与甘氨酸的比例是1:1。13.权利要求11的方法，其中冷冻干燥是在搁板温度下进行的，并且包括∶a)在25至-50℃之间的温度下加载产物；b)逐步冷冻，同时在每个温度下保持，其中冷冻是在低于-32℃的条件下进行的，优选-30℃至-45℃，冷冻速度范围为大约0.5至5℃/min；c)在大约-15℃至-25℃的温度范围内炼韧5小时，而后在-45℃冷冻1小时；d)在初始干燥期间逐步升温，包括：在每个温度下充分保持，导致在-32℃、在大约55μbar的压力下进行升华大约10至30小时；e)二次干燥包括：在25℃至30℃，在55μbar的压力下，以0.5至1℃/min的速率加热产物6-10小时。14.权利要求13的方法，其中冷冻干燥是在搁板温度下进行的，并且包括∶a)在20至5℃之间的搁板温度下加载产物；2CCNN110220268802202694A权利要求书2/2页b)逐步冷冻，同时在每个温度下保持，其中冷冻是在低于-32℃的条件下进行的，优选-30℃至-45℃，冷冻速度范围为大约0.5至1℃/min；c)在-20℃的温度下炼韧5小时，而后在-45℃冷冻1小时；d)在初始干燥期间逐步升温，包括：在每个温度下充分保持，导致在-32℃、在大约55μbar的压力下进行升华大约20小时；e)二次干燥包括：在25℃至30℃，在55μbar的压力下，以0.5至1℃/min的速率加热产物6-10小时。15.权利要求13的方法，其中冷冻干燥循环时间范围是大约30至大约60小时，优选48小时。3CCNN110220268802202694A说明书1/8页稳定、干燥的轮状病毒