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实验诊断课件教学第三章出血、血栓与止血检测生理状态下,血液在血管内流动,它既不会溢出血管外引起出血,也不会在血管内凝固形成血栓,这主要是由于机体内存在着完善的止凝血与抗凝血机制,这种机制呈动态平衡状态。机体的止血机制包括,①血管壁和血小板的止血作用②凝血因子和抗凝血因子的止血作用③纤维蛋白溶解因子和抗纤溶因子的溶栓作用等。病理状态下,止凝血和抗凝血机制的动态平衡失调,若止凝血机制亢进或抗凝血机制减退便会形成血栓,临床上出现血栓性疾病。反之,若止凝血机制减退,或抗凝血机制亢进,便会引起出血,临床上出现出血性疾病,本章重点介绍血栓与止血的检测以及检测项目的选择和应用。 第一节血管壁检测 第二节血小板检测 第三节凝血因子检测 第四节抗凝系统检测 第五节纤溶活性检测 第六节血液流变学检测 第七节检测项目的选择和应用第一节血管壁检测[临床意义]BT延长见于: 1、血小板明显减少,如血小板减少性紫癜; 2、血小板功能异常; 3、血管异常,如遗传性出血性毛细血管扩张症; 4、药物,如服用乙酰水杨酸等。(二)血管性血友病因子抗原测定 [原理]在含血管性血友病因子抗体的琼脂凝胶板中加入一定量受检血浆,在电场作用下泳动一定时间出现抗原-抗体反应形成的火箭样沉淀峰,其高度与受检血浆中VWF浓度呈正相关,计算血浆中血管性血友病因子抗原的含量。VWFAg是血管内皮细胞促凝指标之一,它由血管内皮细胞合成和分泌,参与血小板的粘附和聚集反应,起促凝作用。 1、减低:见于血管性血友病(VWD),是诊断VWD及其分型的指标之一。 2、增高:见于血栓性疾病,如急性冠状动脉综合症ACS,心梗,心绞痛,脑血管病变,DM,妊高症,肾小球疾病,大手术后,恶性肿瘤,免疫性疾病,感染性疾病,MDS等。第二节血小板检测(三)血小板粘附试验 血小板粘附(PAgT)试验常用玻璃柱法、玻璃球法和玻璃器法。 [原理] 血小板具有粘附损伤的血管表面或异物表面的特性。当一定数量的血小板粘附于异物表面上,测定粘附前与粘附后血小板总数的百分率,即为血小板粘附率(%)。[参考值]玻璃柱法:62.5%±8.61%[原理]采用血小板聚集仪比浊法进行血小板聚集试验(PAgT):在富血小板血浆(PRP)中加入诱导剂时,由于血小板发生聚集,悬液的浊度就发生相应的改变,透光度增加。[参考值]血小板聚集图像的参考值见表第三节凝血因子测定[参考值]32~43S,较正常对照值延长10S以上异常 [临床意义]是目前推荐应用的内源凝血系统的筛选试验,又是监测肝素治疗的首先指标。 延长,见于因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、PK,HMWK和纤维蛋白原缺乏。 缩短,见于血栓性疾病和血栓前状态。(二)血浆凝血酶原时间测定 [原理] 血浆凝血酶原时间(PT)测定,在受检血浆中加入组织凝血活酶和Ca2+,使凝血酶原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,观察血浆凝固所需要的时间。PT是反映外源性凝血系统的筛选试验[参考值] PT正常值为11~13S,病人测定值超过对照值3s以上为异常 [临床意义] 1.PT延长:见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ及纤维蛋白原缺乏 2.PT缩短:见于血液高凝状态和血栓性疾病如DIC早期 3.口服抗凝剂的监测(三)血浆纤维蛋白原测定 [原理]在受检血浆中加入一定量凝血酶,后者使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白。 [临床意义]增高:见于DM,急性心梗,急性传染病,风湿热,急性肾小球肾炎,肾病综合症,灼伤,MM,休克,大手术后,妊高症,急性感染,恶性肿瘤以及血栓前状态,部分老年人等。 减低:见于DIC,原发性纤溶症,低(无)纤维蛋白原血症,重症肝炎和肝硬化。(四)血浆因子ⅩⅢ定性试验 [原理]在受检血浆中加入Ca++溶液,使纤维蛋白原变成纤维蛋白凝块,将此凝块置入5mol/L尿素溶液中,如果受检血浆缺乏因子ⅩⅢ,则形成的可溶性纤维蛋白凝块易溶于尿素溶液中。[临床意义]若纤维蛋白凝块在24h内完全溶解,则表示因子ⅩⅢ缺乏,见于先天性因子ⅩⅢ缺乏症和获得性因子ⅩⅢ明显减低,如肝病,SLE,DIC,原发性纤溶症,恶性肿瘤,恶性贫血,溶血性贫血以及抗ⅩⅢ抗体等。第四节抗凝系统检测 (一)血浆凝血酶时间 [原理]TT是在受检血浆中加入“标准化”凝血酶溶液,测定开始出现纤维蛋白丝所需要的时间。 [临床意义] 延长:见于低(无)纤维蛋白原血症,和异常纤维蛋白原血症,血中FDP增高,血中有肝素或类肝素物质存在。(二)甲苯胺蓝纠正试验 [原理]甲苯胺蓝呈碱性,有中和肝素的作用,在TT延长的受检血浆中加入少量甲苯胺蓝,再测定TT。若延长的TT恢复到正常或明显缩短,则表示受检血浆中有类肝素物质存在或肝素增多,若不缩短,则表示受检血浆中存在其他抗凝血酶类物质或缺乏纤维蛋白原。[临床意义]血中类肝素物质增多,见于严重肝病,D