静脉采血血涂片的制备与染色.ppt

一、普通静脉采血法原理：将注射器针头刺入静脉后，利用后抽拉针栓时所形成的负压使血液被吸入针筒实验用品：1、器材一次性注射器、压脉带、消毒棉签、试管。2、试剂30g/L碘酊、75%乙醇。标本静脉血操作标记试管检查注射器操作前准备操作前准备操作前准备扎压脉带操作中静脉采血的常用部位穿刺皮肤操作中抽血止血操作中注意事项2、准备试管
不同检查项目可根据试验需要选择不同的抗凝剂及与血液的稀释比例，如血细胞计数及MCV、MPV等参数测定时应选择适当的抗凝剂，不要用肝素抗凝剂，因为肝素抗凝会影响RBC和PLT的计数结果。选择静脉扎压脉带抽血止血不能弯曲手臂，以免形成血肿。
放血颠倒混匀时，需防止溶血和泡沫产生。切忌振荡试管。
标本检测与保存
血液标本采集后应立即送检，实验室接到标本后应尽快地检查。抗凝静脉血可稳定8～12h，如不能及时测定，应将其置于较稳定的环境中，如4℃冰箱，减少和降低条件的变化。测定前，将其从冰箱内取出，恢复至室温状态，混匀后再测定。用于生物化学检查的标本若不能及时检查，应将血清或血浆与细胞分离，进行适当的处理。一次性器材
只能使用一次，不能反复使用。二、血涂片制备操作方法
步骤：可分5个步骤进行消毒→取血→推片→染色→观察
消毒与取血消毒先按摩取血部位，使血流通畅；再用酒精消毒取血部位（如指尖）。推片取一块边缘光滑的载片做推片。将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°～40°角，向另一端平稳地推出。涂片推好后，迅速在空气中挥干，使之自然干燥。取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。三、血涂片的染色(3)PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均为蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红;在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。染色方法：
1、取病料涂片、自然干燥2、滴加瑞氏染液染0.5-1分钟,使标本被其中甲醇所固定;3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5-10分钟;4、水洗、吸干、镜检。血涂片的观察体尾交界处区分：红细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等