一种利用轮虫检测水中全氟辛酸毒性的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102662035A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102662035A(43)申请公布日2012.09.12(21)申请号201210173624.4(22)申请日2012.05.31(71)申请人北京师范大学地址100875北京市海淀区新街口外大街19号科技处(72)发明人牛军峰张利兰沈珍瑶(51)Int.Cl.G01N33/00(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书33页页附图附图11页(54)发明名称一种利用轮虫检测水中全氟辛酸毒性的方法(57)摘要本发明涉及一种利用轮虫检测水中全氟辛酸(PFOA)生物毒性的方法，属于环境检测技术领域。具体是选用轮虫作为模式生物，此种生物分布广泛、繁殖迅速、世代时间短，存活、繁殖和行为等对环境理化因子的变化敏感；通过不同浓度的PFOA水溶液对轮虫种群密度的改变评价其对生态系统的影响。本发明克服了目前测定水中PFOA生物毒性中周期长、操作复杂的困难，提供了一个简便、灵敏、系统的检测水中PFOA毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。CN102635ACN102662035A权利要求书1/1页1.一种利用轮虫检测水中全氟辛酸(PFOA)毒性的方法，包括步骤如下：1)轮虫的培养轮虫由轮虫培养液“克隆”培养，饵料以绿藻培养液培养的、处于指数增长期的淡水绿藻，培养时间为六个月以上，实验前用轮虫培养液对轮虫进行两周以上的预培养，培养在20±1℃、持续光照条件下进行；2)急性毒性试验将全氟辛烷磺酸(PFOA)设为5个浓度梯度，分别为100.0、50.0、25.0、12.5和6.25mg/L，每个梯度设置4个重复，另设1个空白对照，在每个塑料杯中放入龄长小于2h的轮虫幼体10个，并向每个塑料杯中加入15.0ml特定浓度的PFOA溶液，试验在20±1℃、无光照的恒温培养箱中进行，采用机率单位法分别求得其LC50值；3)不同浓度PFOS对轮虫种群增长率的影响利用两天种群增长率实验评价不同浓度PFOA对轮虫种群增长率的影响，48h后，计算每个处理下轮虫个体总数，种群增长率计算公式：r＝(lnNt-lnN0)/tNt和N0分别为实验结束和实验开始时的种群密度，t＝2d。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3中所述的PFOS浓度为0.25、0.5、1.0和2.0mg/L。2CN102662035A说明书1/3页一种利用轮虫检测水中全氟辛酸毒性的方法技术领域[0001]本发明涉及一种利用萼花臂尾轮虫检测水中全氟辛酸毒性，属于环境检测技术领域。背景技术[0002]全氟辛酸(PFOA)是一种全氟有机酸，具有疏水和疏油的特性，在碳氧化合物表面能使氟化物具有极高的表面活性，且耐高温和耐强氧化剂，化学结构远较其他表面活性剂稳定，因此被广泛用于数百种化学工业、机械工业和日用全氟化工产品中。20世纪50年代以来，大量用于生产皮棉品和地毯防污剂、机械润滑剂、涂料、制冷剂、表面处理剂、泡沫灭火剂、医药品和化妆品，以及电子产品的生产和化学镀膜领域。其大量生产和使用已在全球生态系统中造成了严重的环境累积和持久性污染，成为严重威胁生态环境和人群健康的安全隐患。2005年，美国环境保护署(EPA)将PFOA列为可疑致癌物质。由于该类物质的极性和迁移性使其可以在不被降解的情况下进入海洋或地下水中，对水体中的生物体构成威胁。[0003]急性毒性数据显示，PFOA类物质半致死浓度远高于环境中的实际含量。因此，关于PFOA的低剂量、长期慢性毒性研究更具有现实意义。目前，人类对PFOA等全氟有机化合物对水体中的生物体的毒性影响主要集中在大型植物、两栖动物、鱼类、蚌类和大型蚤类。这些模式和非模式的生物生长周期均在两周以上，试验周期长，不易观察其对后代性征的影响，且由于各个实验条件的差异而缺乏可比性，浪费资源。轮虫是广泛分布于各类水体中的一类浮游动物，分布广泛、繁殖迅速、世代时间短，其存活、繁殖和行为等对环境理化因子的变化敏感，以轮虫为受试生物进行的毒理实验过程的标准化等使其成为水生态毒理学研究的模式生物之一，并被广泛用于水环境的监测。1999年，美国环保局正式把萼花臂尾轮虫和褶皱臂尾轮虫分别作为淡水和海水污染的指示动物列入国家测试标准(ASTM，1999)，利用轮虫研究PFOA的长期慢性毒性影响，有实验周期短、可重复性强、易操作、低成本等优点[0004]本发明提供了一种可以通过轮虫的生命表变化来判断PFOA毒性的方法，材料易得、实验周期短、便于观察PFOA对后代以及整个种群的影响、测试用量少、成本低。发明内容[0005]本发明的目的在于提供一种利用萼花臂尾轮虫检测水中全氟辛酸(PFOA)毒性的方法，即通过检测轮虫在PFOA存在的情况下其无性生殖策略、有性生殖策略及个体