一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN102692478102692478B(45)授权公告日2014.10.22(21)申请号201210173605.1期),719-721.(22)申请日2012.05.31陆正和.杀螟硫磷对褶皱臂尾轮虫毒性效应研究.《海洋环境科学》.2009,第28卷(第6(73)专利权人北京师范大学期),719-721.地址100875北京市海淀区新街口外大街StembergerRS..Ageneralapproachto19号科技处thecultureofplanktonicrotifers..《(72)发明人牛军峰张利兰孙栋CanadianJournalofFisheriesandAquatic(51)Int.Cl.Sciences》.1981,第38卷(第6期),721-724.G01N33/00(2006.01)石娟.不同藻密度下Cd2+浓度对萼花臂尾轮虫生命表统计学参数的影响.《应用生态学(56)对比文件报》.2010,第21卷(第6期),1614-1620.CN1148890A,1997.04.30,全文.审查员叶晓燕CN101162224A,2008.04.16,全文.李大命.杀真菌剂咪鲜安对萼花臂尾轮虫的影响.《生态学报》.2011,第31卷(第11期),3163-3169.黄林.两种拟除虫菊酯类杀虫剂对萼花臂尾轮虫的急性毒性研究.《安徽农业科学》.2011,第39卷(第23期),14172-14174.陆正和.杀螟硫磷对褶皱臂尾轮虫毒性效应研究.《海洋环境科学》.2009,第28卷(第6权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法(57)摘要本发明涉及一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸(PFOS)生物毒性的方法，属于环境检测技术领域。具体是选用轮虫作为模式生物，此种生物分布广泛、繁殖迅速、世代时间短，存活、繁殖和行为等对环境理化因子的变化敏感；通过不同浓度的PFOS水溶液对轮虫种群密度的改变评价其对生态系统的影响，然后以其对轮虫生活史的影响确定PFOS的作用机制。本发明克服了目前测定水中PFOS生物毒性中周期长、操作复杂的困难，提供了一个简便、灵敏、系统的检测水中PFOS毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。CN102692478BCN10269478BCN102692478B权利要求书1/1页1.一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，包括步骤如下：1)轮虫的培养用轮虫培养液对轮虫进行“克隆”培养，以绿藻培养液培养的、处于指数增长期的淡水绿藻为饵料，培养时间为六个月以上，实验前用轮虫培养液对轮虫进行两周以上的预培养，培养在20±1℃、持续光照条件下进行；2)急性毒性试验将全氟辛烷磺酸设为100.0、10.0、1.0、0.1和0.01mg/L5个浓度梯度，每个梯度设置4个重复，另设1个空白对照，从预培养的试管中随机吸取带非混交卵的轮虫雌体若干个置于培养皿中进行培养，2h后收集孵化出的轮虫幼体，将轮虫幼体放入六孔板中，加入测试液，试验在20±1℃、无光照的恒温培养箱中进行，采用机率单位法分别求得其LC50值；3)测定不同浓度全氟辛烷磺酸对轮虫种群增长率的影响通过种群增长率实验评价不同浓度全氟辛烷磺酸对轮虫种群增长率的影响，在试管中放入龄长小于2h的轮虫幼体15个，并添加配制好的各浓度全氟辛烷磺酸溶液至10ml，饵料为1.0×106cells/L的绿藻，全氟辛烷磺酸浓度设置为5组，分别为0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mg/L并设1个对照组；每组均设4个重复，实验在温度为20±1℃的恒温培养箱中进行，实验过程中，每12h悬浮沉积于试管底部的藻类食物，每24h更换内含1.0×106cells/L绿藻的测试液，96h后，对每个试管中轮虫的非混交雌体、混交雌体和不带卵雌体分别进行计数，然后全数返回原培养器皿继续培养24h，之后对混交雌体所携带的休眠卵及试管底部沉积的休眠卵进行计数；4)测定不同浓度全氟辛烷磺酸对轮虫生殖策略的影响设置了不同浓度全氟辛烷磺酸，另加1个空白对照，即使用轮虫培养液培养轮虫用于生命表实验；实验过程为：记录轮虫产第一枚卵所需的时间；并测量其体长体宽，检测全氟辛烷磺酸对其生长发育的影响；之后记录轮虫的产卵数、孵化出的幼体数和母体存活情况，并记录第二代幼体非混交雌体与混交雌体的比例，由此进行水中全氟辛烷磺酸毒性的测定；所述的轮虫培养液为MBL培养液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4中所述的全氟辛烷磺酸浓度为0.01、0.1和1.0mg/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述轮虫为萼花臂尾轮虫。2CN10269247