甘草总黄酮提取工艺的研究.pdf

2第00245年卷9第月3期JournalofZh郑eng州zh工ou程In学sti院tut学eo报fTechnologyV0J．25．No．3

文章编号：1671—1629(2004)03～0061—03

甘草总黄酮提取工艺的研究

王冰，李宏涛，缪铭，闫雪莲
(1．哈尔滨商业大学，黑龙江哈尔滨150076：
2．黑龙江水利专科学校，黑龙江哈尔滨150086)

摘要：研究了甘草总黄酮的提取工艺．根据黄酮的性质，以最大限度的提取甘草总黄酮为目
的，通过正交实验、验证实验和对照实验，确定甘草总黄酮提取的最佳方案为：甘草渣粉末20
g，Ca(OH)20．8g，液固比20：l，酸沉pH值2．5，提取时间2h．以芦丁为标准品，用分光光度法
测定甘草总黄酮最高提取率为2．56％．
关键词：甘草；总黄酮；碱提取；分光光度法
中图分类号：TS201．2文献标识码：B

甘草是一种多年生豆科药食两用植物，其含1．2实验仪器与设备
多种化学成分，甘草酸和甘草黄酮是主要有效成电热恒温水浴锅：HH．SH一4型，北京长安科
分．据报道，甘草黄酮类是一类生物活性较强的成学仪器厂；微型高速万能试样粉碎机：FW80型，天
分，有抗溃疡、抗菌、抗炎、解痉、降血脂、镇痛等作津市泰斯特仪器有限公司；高速台式离心机：
用_lJ．同时还广泛用于食品添加剂(作为低热值TG卜l6型，上海医疗器械六厂；722光栅分光光
甜味剂)及化妆品领域．我国为甘草出口国，目前度计：上海精密科学仪器有限公司；分析天平：
多限于甘草原料及粗制品，价值较低，为此，对甘TG3288型，北京光马仪器厂；抽滤装置(自制)等．
草的深度开发加工和综合利用是一项值得重视的1．3试验方法
课题．本实验研究了利用提取过甘草酸的甘草残1．3．1甘草总黄酮的提取工艺流程
渣在Ca(OH)溶液中回流提取处理得到甘草总甘草渣一干燥一粉碎一过筛一称量一提取一
黄酮_5．6J．通过对照试验得知，该方法提取的甘草过滤一精滤一备用．
总黄酮与其它方法相比含量高且经济效益显著．甘草渣是甘草提取完甘草酸的剩余物质．
同时甘草总黄酮的提取及含量测定有利于研究甘1．3．2甘草总黄酮的提取方法
草的药理和保健作用，为甘草保健食品的开发和甘草渣粉末加人Ca(OH)进行碱液回流提
研究打下良好基础．取，经过滤后向滤液中加人等摩尔的碳酸氢钠后
离心分离，除去碳酸钙沉淀，然后取出上清液，加
1材料与方法入10％的盐酸溶液，再进行离心分离，所得沉淀
干燥后即为甘草总黄酮．
1．3．3甘草总黄酮的测定方法
1．1实验材料
本实验采用亚硝酸钠一硝酸铝比色法测黄酮
甘草：市售；芦丁标准品：市售分析纯试剂；
含量．精密吸取0．5mL含黄酮类化合物的溶液于
氢氧化钙、碳酸氢钠、亚硝酸钠、硝酸铝、乙醇、盐
25mL比色管中，用80％乙醇溶液补充至l2．5
酸、氢氧化钠等：市售化学纯试剂．
mL，加人5％的亚硝酸钠溶液0．7mL摇匀，放置5
min后，加人10％硝酸铝溶液0．7mL摇匀，6min

收稿日期：2004—05—15后再加人lIno1／L氢氧化钠溶液5．0mL，用80％
作者简介：王冰(1963一)，女，黑龙江哈尔滨人，工程师，研究方向乙醇溶液定容至刻度摇匀，放置10min，以上述试
为食品基础原料开发、剂为空白对照，在510nm波长处测定吸收值．利

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用分光光度法制得标准曲线计算黄酮含量
．基础上做验证实验，结果见表3
lll22233

2结果与讨论表3总黄酮提取验证实验结果

l23l23l2

2．1甘草总黄酮提取工艺的优化
2．1．1总黄酮提取正交实验结果
由甘草黄酮的性质及查阅有关资料，选定影
响甘草黄酮提取的主要因素为：水和甘草渣液固
比(A)，Ca(OH)2加入量(B)，酸沉pH值(C)，提
通过验证试验的结果可知，酸沉pH值为2．0
取时间(D)．其因素水平安排见表1．根据单因素23322322
时，提取出的甘草总黄酮重为3．4338g；酸沉pH
对甘草总黄酮提取率的影响，取甘草残渣20g，设
值为2．5时，提取的总黄酮重为3．43346g，二l咖者8m仅636伽56m
颗粒大小为60目／粒度，以此进行I_q(3)正交试
差0．0004g，分析考虑实际情况及经济效益，我们
验，试验结果见表2．
选择A23c3D2为较佳提取条件．

表l甘草总黄酮提取因素水平表2．2甘草总黄酮含量的测定
2．2．1标准曲线及回归方程的建立
2．2．1．1芦丁标准溶液的配制
准确称取干燥恒重芦丁标准样品24．6mg，用
80％乙醇溶解并定容至250mL，摇匀，制成浓度为
0．0984g／L标准液．
2．2．1．2吸光度测定及标准工作曲线的绘制
分别精密吸取标准芦丁溶液0