生物样品多氯联苯分析方法.docx

水生态毒理研究组环境样品中污染物分析方法规范1Page7/6沉积物中多氯联苯类化合物分析规范目标化合物20世纪70年代中期美国在“清洁水法”中规定了129种优先污染物其中包括6类PCBAroclors属于多氯联苯类化合物本论文中研究的主要多氯联苯目标化合物则选择其中有代表性的12种同族物它们分别是：PCB18、28、29、44、52、101、118、138、149、153、180、194（数字均为IUPAC编号）。试剂、器皿和仪器试剂二氯甲烷(Dichloromethane)农残级（美国FisherScientific公司）；甲醇（Methanol）HPLC级（美国FisherScientific公司）；正己烷（n-Hexane）农残级（美国FisherScientific公司）；Florisil（即佛罗里达硅土120目）农残级（美国SIGMA）；中性氧化铝（50－200目）（美国ACROSORGANICS）；无水硫酸钠优级纯经450℃焙烧12h后置于密封广口瓶中保存备用；多氯联苯标准物质：12种多氯联苯同族物组成的混合标样购自美国SupelcoCo.；内标化合物（I.S.）：五氯硝基苯（PCNB）购自美国SupelcoCo；回收率指示物(S.S.)：2456-四氯间二甲苯（TMX）和十氯联苯（PCB209）购自美国SupelcoCo；(SupelcoCo.的材料由北京康林公司购买业务电话：13911205919010-64926155)。剪刀、滤纸、镊子及药匙（硅胶柱净化所用）：以二氯甲烷超声清洗15min两次、正己烷超声清洗15min一次；Florisil在400±2˚C活化2h（activate）；待冷却至室温时称重后装入大口锥形瓶（250或500mL）加入其重量11%的蒸馏水去活性（deactivate）添加过程中应用滴管逐滴加入边加边用力振摇以防止结块并超声振荡30min；放置过夜平衡后加入正己烷浸没其表面备用（一般也需放置过夜）此时的Forisil呈现浅灰色。仪器超声波清洗仪(KQ－250D型数控超声波清洗器)恒温水浴锅（中国科工卫仪器仪表公司）电子天平(精确到0.0001gSartoriusAG.Co.BS1005)冷冻干燥仪(FD-1冷冻干燥机北京博医康公司）旋转旋蒸仪(BuchiVac®500/rotavaporR-200/HeatingbathB-490Germany)氮吹仪(数控氮吹仪KL512/5093康林北京)蛇形索氏提取器(北京玻璃仪器公司250ml)气相色谱仪：HP6890-63Ni微池电子捕获检测器(GC-µECD)(AgilentTechnologies美国)使用AgilentChemStationforGCSystems分析处理数据；毛细色谱柱：HP-5石英毛细管色谱柱：30m0.32mmID0.25m液膜厚不锈钢泥抓斗100级超净工作室；高纯氮气便携式保温箱不锈钢采样小盒玛瑙研钵及研杵玻璃仪器及其它用品专用玻仪：鸡心瓶、K.D浓缩器、8ml定量样品瓶250ml分液漏斗层析柱（长35cm内径1cm带活塞）、GC自动进样的样品瓶。常规玻仪及其他用品：100ml、50ml、10ml量筒；200ml、100ml、50ml烧杯；500ml、50ml试剂瓶；胶头滴管、玻璃漏斗、玻璃棒；100ml、50ml三角瓶（带塞）；坩埚、药匙、5ml移液管、微量进样器、乳胶手套、布手套等。所用玻璃仪器均以10％的稀硝酸浸泡过夜再以重铬酸钾洗液润洗浸泡20min以上分别用自来水、蒸馏水冲洗干净在烘箱中110℃烘干；GC自动进样的样品瓶、标准样品瓶、层析柱必须用铬酸洗液浸泡一段时间后再认真冲洗干净烘干并在400˚C高温烘烤2小时以上。样品采集与保存现场捕捞生物样品(鱼等)放入溶剂淋洗过的不锈钢容器并注明采样时间、采样地点、样品编号、样品名称、采样人姓名等。立即冷冻放入便携式保温箱中带回实验室。样品运回实验室后保存于冰箱（4℃）中密封保存(注意避光)在存放样品时应尽量注意存放在没有有机气体干扰的区域以免交叉污染。所采样品在7天内前处理完毕一个月内分析完毕。样品制备制备冷冻的生物样品在室温下融化后用干净的不锈钢小勺搅拌均匀然后在冷冻干燥仪上冷冻干燥干燥后的样品经研磨(研磨后过60目不锈钢筛)准确称取25.00g沉积物样品加入回收率指示物TMX和PCB209(加入浓度根据当地污染程度确定原则是与样品中目标污染物浓度相接近)在平衡24小时后用滤纸包裹(包裹要严实避免泄漏)。冷冻的生物样品在室温下融化后用干净的不锈钢小勺搅拌均匀然后在冷冻干燥仪上冷冻干燥干燥后的样品经研磨(研磨后过60目不锈钢筛)准确称取5.00g沉积物样品加入回