一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102988329A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102988329A(43)申请公布日2013.03.27(21)申请号201110272817.0(22)申请日2011.09.15(71)申请人天津济命生生物科技有限公司地址300384天津市南开区兰苑路五号4号楼B座303室(72)发明人赵钢王智佳王国新(51)Int.Cl.A61K9/50(2006.01)A61K9/52(2006.01)A61K47/36(2006.01)A61K39/395(2006.01)A61P31/14(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书44页页(54)发明名称一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途(57)摘要发明公开了一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，它是由轮状病毒制备的疫苗，注射到健康产卵的雌禽体内，经此免疫后，取卵黄经除菌、分离提取，纯化得到抗轮状病毒的IgY制剂或将含多种轮状病毒的IgY抗体制剂按比例混合，将混有IgY抗体的海藻酸盐溶液以液滴的方式加入到壳聚糖的混合液中，制备成凝胶态的AP微囊，即抗轮状病毒卵黄抗体微囊制剂。用于该轮状病毒病感染患者的被动免疫治疗，及高危人群预防轮状病毒。CN102983ACN102988329A权利要求书1/1页1.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，其特征是：它是由轮状病毒制备的疫苗，注射到健康产卵的雌禽体内，经此免疫后，取卵黄经除菌、分离提取，纯化得到抗轮状病毒的IgY制剂或将含多种轮状病毒的IgY抗体制剂按比例混合，将混有IgY抗体的海藻酸盐溶液以液滴的方式加入到壳聚糖的混合液中，制备成凝胶态的AP微囊，即抗轮状病毒卵黄抗体微囊制剂。2.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，根据权利要求1所述，其特征是：微囊结构分为微囊膜与内核心部分；其中，微囊膜由海藻酸盐、壳聚糖形成的聚电解质复合水凝胶膜；内核为含有IgY抗体的海藻酸盐液体环境。3.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，根据权利要求2所述，其特征是：微囊膜由海藻酸盐、壳聚糖两种高分子材料通过聚电解质络合反应形成水凝胶膜。抗体微囊的制备方法如下步骤：(1)包埋有纯化IgY的海藻酸盐凝胶微球，称之为A微球；(2)将步骤(1)中的A微球以液滴的方式加入壳聚糖溶液中，将壳聚糖用于海藻酸盐胶囊缓释的包被膜，A微球与壳聚糖溶液体积比例同为1∶1～1∶40，反应1～60分钟，反应温度在0～37℃，此时得到AP微囊取出用生理盐水洗涤。4.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，按照权利要求2或3所述的微囊，其特征在于：微囊产品的膜成分中的海藻酸盐为海藻酸的钾盐或钠盐。5.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，根据权利要求1所述，抗轮状病毒卵黄抗体的制备方法如下步骤：(1)取一种或多种轮状病毒种子毒株经复苏传代，培养增殖轮状病毒，制成轮状病毒疫苗；(2)雌禽适应性饲养，正常产卵一周后，将步骤A制成的疫苗以一定的抗原量进行免疫，加弗氏佐剂，每次0.5mL，皮下或肌肉注射，每7天免疫一次，免疫2～4次，一般抗轮状病毒的IgY抗体在第一次免疫14天后出现，收集卵蛋，4℃保存，隔30天可加强免疫一次；(3)采用步骤B疫苗免疫后的卵蛋，用75％的酒精消毒上述疫苗免疫后的卵黄外壳，去壳，去卵黄膜，取出卵黄，得到该抗轮状病毒的IgY抗体。6.一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途，抗轮状病毒卵黄抗体分离、纯化的制备方法如下步骤：(1)取卵黄，巴氏消毒，直接冻干，制成含有轮状病毒IgY抗体的蛋黄粉；(2)取卵黄，采用水稀释法(WD)法，或聚乙二醇(PEG)法，或硫酸葡聚糖法，或有机溶剂抽提法，或自然胶(藻酸钠、角叉菜胶)法，或乙醇沉淀法等方法，进行分离和提取轮状病毒的IgY抗体，采用层析法，或透析法或超滤法等方法进行纯化，利用DEAE-SepharoseF.F离子交换层析柱或亲和层析法进一步纯化IgY，制得纯的轮状病毒IgY抗体液。7.权利要求1所述IgY抗体微囊制剂，在轮状病毒感染性疾病的被动免疫治疗中的应用。8.权利要求1所述复合型IgY抗体微囊制剂，在高危人群预防轮状病毒的感染中的应用。2CN102988329A说明书1/4页一种卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途技术领域：[0001]本发明涉及治疗、预防轮状病毒感染生物新药的制备以及开发，特别是抗轮状病毒卵黄抗体微囊制剂的制备方法及用途。背景技术：[0002]腹泻病是我国儿童的高发病，约占儿科总住院人数的12％～24％，其中8～12月以轮状病毒引起的秋季腹泻为主。应用抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)治疗轮状病毒性肠炎，为采用被动免疫保护及治疗轮状病毒性肠炎提供了一条新途径。但迄今为止，注射仍然是这类药物临床应用的唯一给药途径，存在突出问题是