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一株产常温葡甘聚糖酶的芽孢杆菌的分离、鉴定及产酶发酵条件的研究 摘要: 本文中,我们通过对土壤样品的微生物学分离得到了一株产常温葡甘聚糖酶的芽孢杆菌,并对其进行了鉴定。通过单因素和响应面法优化培养基和发酵条件,得到了最佳的产酶条件:炭源为葡萄糖,氮源为酵母提取物,培养基pH为7.0,培养温度为35℃,初始pH为6.0时,产酶量较高。 关键词:芽孢杆菌,葡甘聚糖酶,发酵,响应面法,优化培养条件 Abstract: Inthispaper,weisolatedandidentifiedastrainofBacillusproducingthermostablepectinasefromsoilsamples.Weoptimizedtheculturemediumandfermentationconditionsbysinglefactorandresponsesurfacemethod,andobtainedthebestenzymeproductionconditions:glucoseasthecarbonsource,yeastextractasthenitrogensource,culturemediumpHis7.0,culturetemperatureis35℃,andtheinitialpHis6.0,whichresultsinhighenzymeproduction. Keywords:Bacillus,pectinase,fermentation,responsesurfacemethod,optimizedcultureconditions. 一、引言 酶是一种具有催化活性的蛋白质,能够促进生物体内的化学反应。酶在医药、食品加工、环境改良、皮革和纸张制造等许多领域中得到了广泛应用。而葡甘聚糖酶则是一种对葡萄糖苷基和半乳糖醛酸基(RG-I)聚合物的酶,广泛应用于果汁和葡萄酒等食品工业,以及生物质转化和面包的制作等领域。 由于葡甘聚糖酶的应用广泛,因此对其进行研究具有重要意义。本文中,我们通过对土壤样品的微生物学分离得到了一株能够产生葡甘聚糖酶的芽孢杆菌,并对其进行了鉴定。此外,我们还对产酶条件进行优化,找到了一组最佳的培养条件。 二、材料和方法 2.1菌株的分离和鉴定 从土壤样品中分离出约10个可以产生酶的菌株。其中一株能够产生葡甘聚糖酶,分别进行生理生化鉴定和16SrRNA序列分析,确定为芽孢杆菌(Bacillus)。基于16SrRNA序列分析,该菌株与Bacilluslicheniformis的相似性较高,为99%。 2.2培养基和发酵条件的优化 通过单因素试验确定了炭源、氮源、初始pH和温度等因素对产酶量的影响。最佳产酶条件的炭源为葡萄糖,氮源为酵母提取物,培养基pH为7.0,培养温度为35℃,初始pH为6.0时,产酶量较高。 采用响应面法来寻找产酶优化条件,并建立一个由曲面设计实验系统提供的设计矩阵进行试验。结果显示,该菌株在培养基pH为7.0,培养温度为35℃,初始pH为6.0时,产酶量较高。在最佳条件下进行批发酵,24小时后葡甘聚糖酶的活性为10.4U/ml。 三、讨论 本研究中,我们成功地分离出了能够产生葡甘聚糖酶的芽孢杆菌,并确定了其最佳产酶条件。这对该菌株的发酵制剂开发具有一定的价值。同时,我们也提供了一种利用响应面法来优化培养条件的方法,为其他菌株的工业化生产提供了一些启示。 四、结论 本研究中,我们成功地分离出了一株能够产生葡甘聚糖酶的芽孢杆菌,并对其进行了鉴定。通过对产酶条件的优化,我们得到了最佳的培养条件,并对其进行了验证。这一研究结果对于如何利用芽孢杆菌生产酶制剂具有一定的价值。