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重组人白细胞介素-6补料分批发酵工艺研究
随着人类基因工程技术的发展，重组蛋白制备技术已经成为制备大量生物制品的重要手段之一。其中，重组人白细胞介素-6（recombinanthumaninterleukin-6，rhIL-6）具有广泛的生物学活性和潜在的治疗作用，被广泛应用于生物制品和药品的制备中。本文就重组人白细胞介素-6补料分批发酵工艺进行研究。
1.技术路线
本工艺路线主要采用重组大肠杆菌作为细胞表达载体，以T7启动子驱动表达，利用亲和层析技术纯化rhIL-6。发酵工艺采用分批发酵模式，包含生长期和产生期两个阶段。
2.基础培养基与温度的筛选
我们从Luria-Bertani培养基(LB)、TerrificBroth培养基(TB)、2×YT培养基和SuperBroth培养基等中选取适合细胞生长的培养基，并在37℃、30℃、25℃下进行筛选。实验结果表明：在2×YT培养基中，细胞生长更加迅速，生长速率最大且比其他培养基更稳定；在37℃的温度下能够达到最佳的生长效果，此时生物体积变大、代谢物分泌增加。
3.定义培养基组分优化
我们进行了稀释实验来筛选出最优的细胞培养基配方。实验结果表明，含有1%酪蛋白酸钙（CaseinHydrolysate）和1%酵母提取物（YeastExtract）的2×YT培养基对细胞生长具有促进作用。同时，将4%葡萄糖加入培养基也有利于细胞生长。
4.随时监测工艺参数
初始细胞密度是影响细胞生长寿命和生产rhIL-6的主要参数之一。我们比较了细胞密度低、中、高三种情况下的生物物质提取效果，以及不同时刻rhIL-6表达量的变化。实验结果表明，初始细胞密度对rhIL-6的表达有较大的影响，适宜的初始细胞密度约为OD600=0.4。同时，监测溶解氧、pH值和液位变化等重要工艺参数的变化情况，以及随时调整培养基中的营养成分和pH值等有利于优化工艺过程和提高生产效率。
5.结论
本文研究表明，重组人白细胞介素-6补料分批发酵工艺对于我们的生产具有重要的实际应用价值。优化培养基成分，筛选出最适合细胞生长的条件，并结合优化发酵工艺参数，能够在较短时间内获得较高产量和生产效率，为生物技术产业的发展提供一定的支持。