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自选育黑曲霉产酸性蛋白酶发酵条件初步研究
引言
蛋白酶是一种具有广泛应用价值的酶类制剂，广泛应用于生物技术、食品加工、造纸、制药等领域，其中酸性蛋白酶具有较高的应用价值。黑曲霉属于一种常见的真菌，并且在发酵条件的选择方面拥有较高的灵活性，因此选择黑曲霉进行酸性蛋白酶的发酵工艺研究具有一定的研究意义。
材料与方法
1.菌株的筛选与培养
从自然界采集的黑曲霉菌株进行分离、筛选，经过多次负压逐层筛选后，选取产酸性蛋白酶较高的菌株，该菌株保存于冷库中。采用玉米粉、大豆粉等常用的培养基进行黑曲霉的培养。
2.动力学研究
采用光密度法，选取黄曲霉的5种不同培养基，在不同pH、温度下对菌株进行培养，取样检测发酵液中酸性蛋白酶含量的变化，分析不同条件下的细胞生长和酸性蛋白酶的产量。基于不同培养条件下黑曲霉的生长特性以及蛋白酶产生的动力学规律，优选出最佳条件。
3.酸性蛋白酶酶活力的测定
采用酶标仪检测不同处理组样品中酶活力的变化，通过比较各组与对照组的活化程度，确定最佳的培养条件。
结果与讨论
在5种不同的培养基中，基于黄曲霉的生长特性及酸性蛋白酶产生的动力学规律，最优培养条件得出为：
·柠檬酸10g/L,NaNO310g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,FeSO4·7H2O0.01g/L调节pH至5.0
·温度28℃
·发酵时间48小时
在最优酵母条件下，酸性蛋白酶的产量最高可达到48.61U/mL，达到了较高的发酵效率；此外，该条件下的酶活力最高为752.92U/mL，表明该培养条件下能够培育出优质、高效的黑曲霉酸性蛋白酶。
结论
本研究通过对自选育黑曲霉产酸性蛋白酶的发酵条件进行研究，确定了最佳的酵母条件为：柠檬酸10g/L,NaNO310g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,FeSO4·7H2O0.01g/L调节pH至5.0，温度28℃，发酵时间48小时。该条件下的酶活力可高达752.92U/mL，表明该条件下能够优质、高效地培育出黑曲霉酸性蛋白酶。