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双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化
双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化
随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，短肽作为一种重要的营养组分，受到越来越多的关注和研究。米糠作为一种常见的副产品，在加工中产生了大量的浪费和环境污染，因此如何利用米糠制备高质量的短肽成为了一个热门的研究课题。本文旨在探讨双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化问题。
一、试验方法
本次试验的主要设备和试剂包括：米糠、蛋白酶、纤维素酶、水浴、恒温离心机、取样瓶、电子天平等。
1.米糠的预处理
将米糠放在100℃的水浴中加热30min，烷基化处理后，将烷基化的米糠过筛，把筛下的粉末进行柿子酸浸泡处理，去除杂质。提取浸泡液体进行榨干，获得预处理后的米糠。
2.双酶酶解实验
将预处理后的米糠与蛋白酶和纤维素酶按照不同的配比混合在一起，然后放入水浴中恒温酶解，时间、酶解剂用量、温度、酶解方式、酶解液pH值等多个因素进行优化，并在一定时间内每隔一段时间取样分析，以短肽含量为评价指标，通过单因素试验和正交试验进行参数优化。
3.短肽含量分析
取样溶液通过洗脱、酸解、离心等步骤，采用紫外分光光度计检测其吸光度，据此计算短肽的含量。
二、试验结果
1.单因素试验结果
通过单因素试验发现，在蛋白酶和纤维素酶的酶解条件下，米糠在37℃条件下酶解时间越长，短肽含量越高，但在酶解时间超过24h后，短肽含量变化不大；在固定酶解时间下，加入适量的纤维素酶可以增加短肽含量，但是当纤维素酶用量过高时，会对短肽的生成产生不利影响；在调整pH值时，当pH值为7~9时，短肽含量较高；酶解液温度为37℃时，短肽含量最高。
2.正交试验结果
根据单因素试验的结果，本试验设计了4个因素、3个水平的正交试验，包括酶解时间、纤维素酶用量、酶解液pH值和温度。结果表明，在酶解时间为18h、纤维素酶用量为0.4%、酶解液pH值为8、酶解温度为37℃时，短肽含量可达到最高值。
三、讨论
从试验结果可以看出，在双酶体系下，酶解时间、纤维素酶用量、酶解液pH值和温度都对短肽含量有重要影响。在米糠的直接酶解过程中，纤维素酶作为辅助酶剂可以增加酶解的效率，提高短肽含量。通过正交试验，可以确定最优实验条件，得出短肽含量达到最高值的方案，为后续的工业化生产提供了可靠的依据。
四、结论
本试验采用双酶直接酶解米糠制备短肽，通过单因素试验和正交试验，确定了最优实验条件，即酶解时间为18h、纤维素酶用量为0.4%、酶解液pH值为8、酶解温度为37℃；在此条件下，短肽含量可达到最高值。本研究结果为米糠的高效利用提供了技术支持，并为短肽的生产和应用提供参考。