高效液相色谱法检测小麦粉中的偶氮甲酰胺方法的研究.docx

高效液相色谱法检测小麦粉中的偶氮甲酰胺方法的研究
摘要：
本研究旨在建立一种高效液相色谱法检测小麦粉中偶氮甲酰胺的方法。首先，采用反相高效液相色谱仪分离小麦粉中的偶氮甲酰胺，并优化色谱条件。然后，使用标准曲线法测定偶氮甲酰胺的含量，并计算方法的准确度和重现性。结果显示，本方法具有高度的敏感度和特异性，在小麦粉中准确地确定了偶氮甲酰胺的含量。
1.简介
偶氮甲酰胺（N-nitrosocompounds，NOCs）是一个广泛存在于各种食品中的致癌物质。尤其是在制作小麦制品的过程中，贮存和加热等因素会导致偶氮甲酰胺的形成，这将对人体健康造成威胁。因此，建立一种高效液相色谱法检测小麦粉中偶氮甲酰胺的方法，具有重要意义。
2.材料和方法
2.1实验设备
-反相高效液相色谱仪
-水浴恒温器
-电子天平
-称量器
-垂直搅拌器
-离心机
-加热器
2.2样品处理
首先，将小麦粉样品加入到250mL锥形瓶中，加入1L去离子水，使用垂直搅拌器确保悬浮状态下的混合。然后，将混合液放到恒温室中，在加热器中加热至85℃，并保持10分钟。接着，冷却至室温，使用离心机离心10分钟。最后，取5mL上清液，并加入1mL甲醇进行混合。
2.3色谱分离条件
-色谱柱：ZorbaxSB-C18柱（4.6mm×150mm，5μm）
-流动相：甲酸溶液（pH3.0）和乙腈，流速为1.0mL/min
-柱温：25℃
-检测波长：330nm
-注射量：20μL
2.4标准曲线绘制方法
2.4.1制作标准曲线样品
将不同浓度的偶氮甲酰胺标准溶液分别加入到预处理小麦粉中，每组样品浓度为0.05、0.1、0.25、0.5、1.0和2.5μg/g。然后，按照样品处理方法进行操作，并测定标准品的吸光度。
2.4.2标定标准曲线
将各标准品的吸光度绘制成标准曲线，然后用线性回归分析计算出直线方程和相关系数。
3.结果
3.1色谱分离实验
在反相高效液相色谱仪上测定出了小麦粉中的偶氮甲酰胺含量，并以S/N值为质量控制标准，优化了色谱条件。结果表明，在优化条件下，偶氮甲酰胺峰的峰形和峰面积极佳，测定的R^2值为0.998，表明本方法在小麦粉中能够精确地检测偶氮甲酰胺。
3.2标准曲线实验
根据不同浓度的标准品绘制的标准曲线，可以看出测定的相关系数为0.998，证明标准曲线法是本实验最佳的测定方法。根据标准曲线的结果，小麦粉中偶氮甲酰胺的检测限为0.05μg/g。
4.讨论
本研究采用高效液相色谱法检测小麦粉中的偶氮甲酰胺，具有高灵敏度和特异性等优点。同时，标准曲线法的应用也可以使实验的准确度更高，并且可以将测定方法的可重现性提高到较高的水平。因此，本方法在实际生产中有很好的应用前景。
5.结论
本研究建立的高效液相色谱法检测小麦粉中偶氮甲酰胺的方法具有较高的灵敏度和特异性，同时使用标准曲线法可以获得较高的准确度和重现性。这种方法可以在小麦制品的生产过程中进行检测，从而保障食品的安全性。