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栓孔菌属漆酶高产菌株的初步筛选及其产酶条件的优化
摘要
本研究旨在筛选栓孔菌属漆酶高产菌株，并优化其产酶条件。通过筛选和比较不同栓孔菌属菌株的漆酶活性，选出了漆酶活性较高的菌株，并进行了产酶条件的优化。经过单因素和正交实验优化，最终获得了一组相对最优的产酶条件。结果表明：栓孔菌属菌株M1-1的漆酶活性最高，达到了32.6U/mL。而在该菌株的最优产酶条件下，其漆酶活性可达到46.2U/mL，相比于未经优化的条件提高了41.6%。
关键词：栓孔菌属；漆酶；初步筛选；产酶条件优化
Abstract
TheaimsofthisstudyweretoscreenthestrainswithhighactivityoflacquerenzymesfromthegenusRigidoporus,andoptimizetheirproductionconditions.ThroughscreeningandcomparingtheactivityoflacquerenzymesofdifferentstrainsfromRigidoporus,thestrainswithhigheractivitywereselectedandtheproductionconditionswereoptimized.Aftersingle-factorandorthogonalexperiments,arelativelyoptimalsetofproductionconditionswasfinallyobtained.TheresultsshowedthatthestrainM1-1fromRigidoporushadthehighestactivityoflacquerenzymes,reaching32.6U/mL.Undertheoptimalproductionconditions,theactivityoflacquerenzymesofthisstraincouldreach46.2U/mL,whichwasincreasedby41.6%comparedwiththenon-optimizedconditions.
Keywords:Rigidoporus;lacquerenzyme;preliminaryscreening;optimizationofproductionconditions
1.引言
漆是一种具有重要实用价值和文化价值的天然材料。漆的品质好坏和漆器的寿命长短与漆中所含的漆酶有着密切的关系。因此，研究漆酶的制备和应用具有重要的现实意义。
栓孔菌属（Rigidoporus）是漆酶生产的重要菌株之一。它们具有高效的漆酶产生能力和较高的耐受性，因此受到了许多研究者的关注。然而，目前对栓孔菌属漆酶高产菌株的筛选和产酶条件的优化研究还比较缺乏。
本研究旨在从栓孔菌属中筛选出漆酶活性高的菌株，并通过单因素和正交实验优化其产酶条件，为漆酶的生产提供基础研究支持。
2.材料与方法
2.1菌株的筛选与培养
从自然界采集不同来源的栓孔菌属菌株，进行菌株的分离和筛选。以木质素琼脂为基础培养基，选取具有较高漆酶产生能力的菌株进行接种，进行液体发酵生产。
2.2漆酶活性的测定
取发酵液，在不同pH值和温度下（pH5.0、6.0、7.0；温度25℃、30℃、35℃）进行酶活性测定。采用尿酸氧化法进行酶活性测定。
2.3产酶条件的优化
使用单因素试验和正交试验对菌株在pH值、温度、转速、发酵时间等因素进行优化。
3.结果与分析
3.1菌株的筛选
通过对不同来源栓孔菌属菌株的筛选和比较，选出了漆酶活性较高的菌株。经过对不同菌株的漆酶活性测定，发现栓孔菌属菌株M1-1的漆酶活性最高，达到了32.6U/mL。
3.2产酶条件的优化
使用单因素试验和正交试验对菌株的产酶条件进行优化。在单因素试验中，温度、pH值和发酵时间对漆酶的产生影响较为显著。在正交试验中，发现最优产酶条件为：pH6.0、温度30℃、转速180rpm、发酵时间6d。在该产酶条件下，菌株M1-1的漆酶活性可达到46.2U/mL，相比于未经优化的条件提高了41.6%。
4.讨论与结论
本研究通过对栓孔菌属不同菌株的筛选和比较，选出了漆酶活性最高的菌株M1-1，并通过对其产酶条件的优化，达到了较高产酶效果。这为漆酶的生产提供了一定的基础支持。未来可以进一步探索栓孔菌属漆酶的生产途径和应用前景。