高温淀粉酶高产菌株筛选及产酶条件优化.docx

高温淀粉酶高产菌株筛选及产酶条件优化摘要为筛选高温淀粉酶高产菌株利用淀粉酶水解圈作筛选模型从稻田中采集土样筛选得到产淀粉酶能力较高的菌株E10。为提高菌株产酶能力进行了碳源种类及浓度氮源种类及浓度无机盐种类及浓度pH值种龄及接种量、温度、时间的单因素试验并对发酵培养基及发酵条件进行了L9（34）正交优化试验。结果表明：最佳产酶发酵培养基为2.0%麸皮、0.1%硝酸钾、0.25%氯化钙最适初始pH值为6.0。最适产酶条件为种龄24h接种量7mL于36℃下培养48h。在优化条件下菌株产酶活力可达180.94IU/mL。关键词高温淀粉酶；高产菌株；筛选；发酵条件中图分类号TQ925+.1文献标识码A文章编号1007-5739（2014）07-0240-04ScreeningofHigh-yieldStrainProducingThermostableAmylaseandOptimizationofEnzymeProductionYIZheng-xuanZHAOTongSHIXuanWANGZhengLILi-heng*（CollegeofBioscienceandTechnologyHunanAgriculturalUniversityChangshaHunan410128）AbstractInordertoscreenahigh-yieldstrainproducingthermostableamylasestarchhydrolysiscirclewasemployedasascreeningmodel.TheE10strainachievedfromthepaddyfieldsoilhashighcapacityofenzymeproduction.InordertoimprovethecapabilityofenzymeproductionofE10thesinglefactorexperimentswasconductedforthekindsandconcentrationsofcarbonsourcethekindsandconcentrationsofnitrogensourcethekindsandconcentrationsofinorganicsaltpHvalueseedageinoculatevolumetemperatureandtimethentheL9（34）orthogonaloptimizationtestforthefermentationmediumandconditionswascarriedout.TheresultsshowedthatthebestfermentationmediumoftheenzymeproductionofE10was2.0%wheatbran0.1%KNO30.25%CaCl2initialpHvalueof6.0.TheoptimalfermentationconditionsoftheenzymeproductionofE10were24hoursofseedage7mLofinoculatesvolume36℃ofculturetemperature48hoursoftime.UndertheoptimizedconditionstheenzymeproductionofE10reached180.94IU/mL.Keywordsthermostableamylase；high-yieldstrain；screening；fermentationcondition淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称广泛分布于动物（唾液、胰脏等）、植物（麦芽、山菜）及微生物中是最早实现工业生产并且迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种[1]。20世纪60年代以来由于酶法生产葡萄糖以及用葡萄糖生产异构糖浆的大规模工业化生产淀粉酶的需求量越来越大几乎占酶制剂总产量的50%以上。淀粉酶为作用于淀粉、糖原等α-14-葡聚糖水解α-14-糖苷键的酶。根据酶水解产物异构类型的不同可分为α-淀粉酶（EC3.2.1.1）与β-淀粉酶（EC3.2.1.2）水解产物为糊精、麦芽寡糖、麦芽糖和葡萄糖[2