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牛血清的病毒安全检测与病毒灭活工艺.ppt

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中国医药生物技术学会质量控制专业委员会 第三届动物血清生产与管理学术研讨会 牛血清的病毒安全检测与病毒灭活工艺 ViralSafetyDetectionand ViralRemoval/InactivationofBovineSerum在人用和动物用疫苗的制备过程中，牛血清是最为重要的细胞培养添加物。 鉴于世界卫生组织（WHO）提倡疫苗生产的细胞基质从动物的使用转换为细胞培养，牛血清的应用会得到进一步的扩大。 可以认为，如果没有充足牛血清的供应，许多医药产品的生产和供应均将受到极大的影响。 WHO和各国管理当局、行业协会等高度关注医药产品生产使用细胞基质的安全问题，尤其是潜在病毒污染的问题。 疫苗病毒安全性的可能污染途径：活疫苗种毒的污染，制备工艺中原、敷料的污染和其他需要考虑的问题。 其中，牛血清的质量控制与病毒安全检测最受关注。细菌性疾病：结核杆菌病、布鲁氏杆菌病、沙门氏菌病、炭疽…… 病毒性疾病：口蹄疫、传染性海绵样脑病、白血病、蓝舌病…... 寄生虫性疾病：日本分体吸虫病、弓形体病…… 消除牛源病原体技术DNA病毒 牛乳头状瘤病毒（bovinepapillomaviruses,BPV） 牛多型瘤病毒（bovinepolyomaviruses,BPyV） 腺病毒（Adenoviruses） 疱疹病毒（Herpesviruses） 牛痘病毒（Poxviruses） 细小病毒（Parvovirus）等RNA病毒 口蹄疫病毒（FMDV）牛病毒性腹泻病毒（BVDV） 轮状病毒（Rotavirus）呼肠孤病毒（Reovirus） 牛白血病病毒（BLV）牛免疫缺陷病病毒（BIV） 蓝舌病病毒（BTV）牛呼吸道合胞体病毒（BRSV） 狂犬病病毒（RV）等 倍受关注的朊病毒 牛海绵状脑病(Bovinespongiformencephalpopathy,BSE)因子。2007年09月2007年09月2007年09月2007年09月2007年09月朊病毒very slow细胞培养 抗体检测 抗原检测 核酸检测细胞培养 主要检测血清中是否存在可致敏感细胞病变的病毒，一般要求至少使用2种细胞，其中1种细胞为牛源细胞。 抗体检测 主要检测血清中某些病毒的抗体，预示牛群曾经感染病毒或接种过疫苗，普遍要求BVDV抗体为必检项目 抗原检测 主要检测血清中某些病毒蛋白的存在，预示血清来源的牛群近期感染或潜在感染了某种病毒，如BVDV、BTV、腺病毒、狂犬病病毒等，常用的方法是ELISA、免疫荧光技术等 核酸检测 主要检测血清中某些病毒核酸的存在，预示血清来源的牛群近期感染或潜在感染了某种病毒，如BVDV、FMDV、BTV、细小病毒等，常用的方法是PCR、RT-PCR、荧光定量PCR等。朊病毒的构象依赖性免疫测定 构象依赖性免疫测定方法（conformation-dependentimmunoassay,CDI） 能检出微量的prion蛋白，5h即可出结果。 可检测出8株prion，其中包括分别导致绵羊痒病、鹿的慢性消耗性疾病和疯牛病的各株prion。 可用于检测活动物。对西班牙、德国和英国的11000头屠宰牛检测结果完全与现在应用的方法相符，而且在实验室和田间试验中，还没有发现假阴性或假阳性结果。 该方法的另一突出优点是自动化，因此可以用于大量动物的筛选。PositiveControlDilutiontoEnd-Point血清的病毒清除/灭活工艺血清的病毒清除/灭活工艺血清的病毒清除/灭活工艺γ射线灭活病原体的机理γ射线消毒杀菌的优缺点纤维蛋白原病毒灭活前后效果比较 病毒灭活前的纤维蛋白原病毒灭活后的纤维蛋白原γ射线辐照在血浆病毒灭活中的应用病毒安全检测的有关工作病毒安全检测的有关工作病毒安全检测的有关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作牛血清病毒安全检测的相关工作谢谢各位！