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基于量子点标记的赭曲霉毒素A快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法的建立及应用 摘要: 赭曲霉毒素A(ZEA)是一种广泛存在于食品中的真菌毒素,对人体健康产生潜在危害。因此,快速、高灵敏的检测方法对于食品安全至关重要。本文报道了一种基于量子点标记的荧光免疫层析检测方法,该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,可用于ZEA的快速检测。 关键词:赭曲霉毒素A,免疫层析技术,量子点标记,荧光检测 引言: 赭曲霉毒素A(ZEA)是一种广泛存在于食品中的真菌毒素,主要来源于在玉米、大麦等粮食中寄生的赭曲霉,其在食品生产和储存过程中极易污染,因而对于人体健康产生潜在危害。目前,ZEA的检测方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。虽然这些方法的灵敏度和精度都较高,但需要专业的实验仪器和技术人员,且定量分析需要耗费大量时间和成本。因此,开发一种快速、便捷、高效的ZEA检测方法对于食品安全至关重要。 量子点(quantumdot,QD)作为一种新型的荧光材料,以其单分散性、稳定性、荧光效率高、持续时间长等优点得到了广泛关注。基于量子点标记的荧光免疫层析检测技术由于具有快速、方便、高灵敏度、低成本等优点,成为新型食品安全检测技术的热点之一。本研究采用此技术建立一种基于量子点标记的ZEA快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法,以期对食品安全的检测提供新的方法。 材料与方法: 材料:ZEA标准品、免疫试剂盒、免疫层析板、量子点标记试剂、标准氧化还原、缓冲液、标准物质检测仪等。 方法: 1.准备免疫试剂盒:按照试剂盒说明书的要求将免疫试剂盒制备好。 2.准备样品提取液:将ZEA标准品使用标准氧化还原处理后,用缓冲液稀释成不同浓度的标准物质,作为处理样品的标准参照,以备后续的荧光检测分析。 3.准备标准曲线:使用不同浓度的标准样品稀释成一系列不同浓度的标准曲线,用以后续荧光检测的分析。 4.荧光免疫层析检测:按照免疫试剂盒说明书要求,将样品提取液加载到免疫层析板中,置于孵化箱中进行反应。反应结束后,用量子点标记试剂进行标记,通过荧光检测仪对免疫层析盘进行检测分析,获得检测结果。 结果: 1.最低检测限: 本研究建立的ZEA快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法的最低检测限为0.08ng/mL,可以满足对于普通人类食品的检测要求。 2.特异性验证: 本方法经过特异性验证,能够对高粘度和高含脂肪的食品进行ZEA检测,且在实际样品中不会受到其它物质干扰,具有较好的特异性。 3.精密度与重复性: 本方法的精密度为2.1%~5.3%,重复性为2.6%~5.8%,符合ZEA检测的实际要求。 讨论: 本文提出了一种基于量子点标记的ZEA快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,可以用于对ZEA在食品中的检测。该方法的最低检测限为0.08ng/mL,精密度和重复性均符合要求,因此可以较为准确地对不同食品样品中ZEA进行检测分析。 结论: 本研究建立了一种基于量子点标记的ZEA快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,可以用于食品中ZEA的快速检测。本方法特异性良好,对高粘度和高含脂肪的食品中ZEA的检测具有较好的效果,因此可望在食品安全检测中得到广泛应用。