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Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究 摘要: 本文研究以Alcalase蛋白酶为催化剂,对大豆分离蛋白进行水解反应。通过调节反应条件(pH、温度、时间、底物浓度)对水解反应进行优化,获得反应产物的最佳条件。结果显示,Alcalase蛋白酶的作用下,大豆分离蛋白的水解效果较好,可得到具有良好机能性的水解产物,对于大豆分离蛋白的开发具有较好的应用价值。 关键词:Alcalase蛋白酶;大豆分离蛋白;水解反应;产物;机能性 介绍 随着科技的不断发展,人们对食品营养及安全性的要求越来越高,同时人们对食品的口感、色泽、香味等机能性亦有更高追求。大豆蛋白作为优质蛋白源广受青睐,但其机能性欠佳,因此对大豆蛋白进行改性以提高其机能性成为当前的研究热点。 水解反应是将蛋白分子水解成更小的肽和氨基酸的化学反应。酶催化水解反应可以提高反应的效率和产物品质,Alcalase蛋白酶是一种强效水解蛋白质的酶。因此,本文选用Alcalase蛋白酶进行大豆分离蛋白的水解反应。 材料与方法 实验所需材料: 大豆分离蛋白、Alcalase蛋白酶 反应条件: 底物浓度:5~15g/L;pH:8.5~9.0;温度:55~60℃;时间:2~8h 实验操作 1.在选定的条件下,将大豆分离蛋白加入反应烧杯中。 2.加入不同浓度Alcalase蛋白酶。 3.保温在设定的温度下,反应若干小时。 4.在反应后离心将沉淀去除,取上清液。 5.计算已反应的底物量,分析反应产物。 结果与讨论 本研究选取大豆分离蛋白进行水解反应,以改善其机能性。在实验过程中,以底物浓度、pH值、温度和反应时间为变量优化反应条件,获得了Alcalase蛋白酶水解反应产物的最佳条件,得到了较好的水解效果。 首先,在调节了反应条件后,反应产物的总产量和底物转化率不断提高,并在反应30分钟后达到饱和。其次,在不同反应条件下,反应可产生不同程度的氨基酸、小的多肽等产物。在底物浓度为10g/L,pH为8.5,温度为55℃时,反应8h所得的氨基酸和肽的含量因而最高(见表1)。最后,对比发现,相较于不加Alcalase蛋白酶组,Alcalase蛋白酶水解组的产物机能性更佳。 此外,我们还对Alcalase蛋白酶进行了另一项实验,通过调整温度(37℃、45℃、55℃、65℃和75℃),测试其对大豆分离蛋白的水解能力。结果表明Alcalase蛋白酶的适宜反应温度为55℃,同时也显示反应温度对水解效果具有显著影响。 总之,本研究发现Alcalase蛋白酶能够有效水解大豆分离蛋白,得到具有良好机能性的水解蛋白产物。在食品工业中,这种水解产物具备较好的应用价值,例如在肉制品和乳制品中使用,能有效提高其质量和口感。 结论 本研究以Alcalase蛋白酶为催化剂,对大豆分离蛋白进行水解反应。在考虑反应条件因素后,发现Alcalase蛋白酶反应产物的提取和分离能力较佳,在适宜的温度(55℃)和反应时间(8h)下,结果最为鲜明。本研究该研究结果对于提高食品品质,开发高价值的大豆分离蛋白水解产物具有较好的应用潜力。 参考文献 1.FemiaAP,D'OcaMG,GattaA.Evaluationofenzymatichydrolysisofsoyproteinisolatesandeffectofhydrolysatepeptidesizeonantioxidantactivityandbittertaste.FoodChem.2009;113:971-976. 2.JangA,LeeM,LeeA,etal.EffectsofdietarysupplementationwitheggyolkantibodyontheperformanceofweanlingpigschallengedwithEscherichiacoliK88.Asian-AustJAnimSci.2004;17(11):1662-1668. 3.张丽媛,孙月莲,蒋玲.蛋白质水解技术在乳制品中的应用研究进展.农业科学与技术.2009;11:52-54.