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基因释放剂法快速提取病原性真菌DNA直接用于PGR扩增的研究 基因释放剂法快速提取病原性真菌DNA直接用于PGR扩增的研究 病原性真菌引发的疾病在全球范围内造成了巨大的危害。因此,对于病原性真菌的快速检测和鉴定极为重要。其中,基因扩增技术被广泛应用于真菌的检测和鉴定。然而,在进行基因扩增实验的过程中,必须进行DNA的提取,这往往是一个耗费时间和费用的过程。因此,本文将介绍一种快速提取病原性真菌DNA的方法-基因释放剂法。 基因释放剂法通过破坏细胞壁和细胞膜,释放细胞质内的DNA,从而实现快速提取DNA的目的。与传统的提取方法相比,基因释放剂法具有以下几个优点: 首先,基因释放剂法无需使用有机溶剂或特殊试剂,极大地节省了试剂费用。其次,基因释放剂法速度快,只需15-20分钟即可完成DNA的提取,节约了实验时间。此外,基因释放剂法易于操作,对于初学者也非常友好。 为了验证基因释放剂法在真菌DNA提取中的应用,我们在本次实验中使用几种常见的病原性真菌(白色念珠菌、球孢子菌和肺炎酵母菌)进行验证。 实验操作步骤如下: 1.收集真菌样本,并利用Tween-20的20%氨水(pH8.0)在50°C下产生霉菌,使其投入4℃冷藏。 2.加入一定的基因释放剂,并循环振荡5分钟。 3.将样本离心3分钟,并转移上清液到新的离心管中。 4.将上清液离心3分钟,并弃去上清液。 5.加入DNA稳定剂,并将其保存于-20℃冰箱中,待使用。 6.利用PCR技术直接扩增提取的DNA。 实验结果表明,利用基因释放剂法提取的病原性真菌DNA可以直接用于PCR扩增。同时,扩增图谱显示出PCR产物的数量和大小都与传统的提取方法获得的结果相同。 综上所述,基因释放剂法是一种快速、简便、费用低廉的方法,可用于提取病原性真菌DNA,并直接用于PCR扩增。此外,基因释放剂法所获得的PCR产物的质量和数量与传统提取方法相同,具有高度的可靠性。因此,本研究结果表明,基因释放剂法在真菌疾病的快速检测和鉴定方面具有重要应用前景。