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双歧杆菌耐氧发酵菌株制剂的研究(Ⅰ)——耐氧型双歧杆菌的分离和特性鉴定 双歧杆菌是一种重要的益生菌,能够在肠道中发挥重要的生态学作用。然而,双歧杆菌在自然环境中很容易失活,影响了益生菌制剂的质量和稳定性。因此,寻找新型双歧杆菌菌株并研究其特性,对于制备高质量的益生菌制剂至关重要。本文旨在研究耐氧型双歧杆菌的分离和特性鉴定。 一、试验材料和方法 1.试验材料 本试验采用了30只健康小鼠的粪便样本进行分离和筛选。 2.培养基和条件 试验过程中使用了MPT培养基,并将培养条件控制在37℃,pH值为6.5的条件下。 3.分离方法 将采集到的小鼠粪便样本进行粉碎并混合均匀后,取适量样品接种于MPT培养基上。培养24小时后,进行菌落计数,并随机选取10个菌落进行传代培养,得到单菌系后,进行进一步测试。 4.特性鉴定 通过形态学、生理生化测试和16SrRNA基因测序来进行菌株的特性鉴定。 二、结果与讨论 1.耐氧型双歧杆菌的分离 从30只小鼠样本中,最终筛选出5株耐氧型双歧杆菌,具有较高的生长速度和孢子形成能力。这些双歧杆菌的菌落呈现出淡黄色或者灰白色,表面较为平整。 2.双歧杆菌的形态学特点 在镜下观察,这些耐氧型双歧杆菌呈现为长而细的杆状菌体,长度约为2-3微米,直径约为0.5微米。这些细胞外形整齐,短链条排列,并且具有顶端或近顶端的芽孢。 3.双歧杆菌的生理生化特性 这些耐氧型双歧杆菌能够利用葡萄糖、果糖、半乳糖、木糖、甘露糖和麦芽糖等多种碳源进行生长。在进行气体发酵时,能够产生乳酸和乙酸等有机酸,同时表现出较强的缺氧耐受性。 4.双歧杆菌的16SrRNA基因测序结果 为了进一步确认这些细菌的分子生物学特性,我们对其进行了16SrRNA基因测序。结果表明,这些耐氧型双歧杆菌属于Bifidobacterium部属,并与Bifidobacteriumanimalis的亲缘关系较为接近。 三、结论和展望 本文成功地分离出了5株具有灵活性和较高生长速度的耐氧型双歧杆菌。这些菌株能够利用多种碳源生长,并且表现出良好的缺氧生长能力。同时,这些菌株与Bifidobacteriumanimalis的亲缘关系较为接近。这些结果证明了这些双歧杆菌能够作为潜在的益生菌菌株,并为制备高质量的益生菌制剂提供了新的选择和思路。未来的研究可通过进一步优化制剂配方、改进制剂工艺等手段,来提高制剂的活菌量和质量。