离子交换色谱.pptx
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第七节离子交换色谱离子交换色谱(ion-exchangechromatography,IEC)是发展最早的色谱技术之一。20世纪30年代人工合成离子交换树脂的出现对于离子交换技术的发展具有重要意义,基于苯乙烯-二乙烯苯的离子交换树脂至今仍是最广泛使用的一类离子交换树脂。但它并不十分适合对生物大分子如蛋白质、核酸、多糖等的分离,因为:①树脂交联度太大而颗粒内网孔较小,蛋白质分子无法进颗粒内部,只能吸附在表面,造成有效交换容量很小;②树脂表面电荷密度过大,使蛋白质在其上吸附得过于牢固,必须用较极端的条件才能洗
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22液相色谱技术Chromatography背景色谱法的基本原理慢中等快22.1色谱的基本概念分配系数可由Langmuir方程得出Kd---分配系数q、c---溶质在固相和液相中的浓度保留时间(tR)和保留体积(VR)反应样品在柱子中的保留或阻滞能力,是色谱过程的基本热力学参数之一。分离度:又称分辨率,用来表示两种洗脱曲线相邻的溶质相互分离的程度。阻滞因子Rf阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物(与固定相没有亲和力的流动相Kd=0)的迁移率之比其意义在于体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大小.洗脱
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会计学分离纯化生物大分子以离子交换色谱快速纯化8一淀粉酶为例本研究利用合成的强阴离子交换柱很好地分离了a-淀粉酶粗品,其活性回收率高达96%,比活性达388ug/mg蛋白质纯度提高30倍。此法的研究成功为大规模制备高纯度a-淀粉酶提供了一个新工艺路线。2.0实验部分/3.0结果与讨论//由图2可知,在2.0mol/L以下,随盐浓度的增加,洗脱能力增大,活性回收率提高。洗脱液中离子强度对洗脱效率的影响可归结为离子交换平衡的移动,这种色谱行为表明该固定相具有典型的阴离子交换特性,符合离子交换色谱的洗脱规律。但
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离子交换柱色谱法离子交换柱色谱法一、分配原理离子交换剂对各组分亲和力不同——选择系数不同——分离(一)选择系数:KS=[R⁻X⁺]/[X⁺]离子交换平衡:R⁻A⁺+B⁺⇌+R⁻B⁺+A⁺KA/B=[R⁻B⁺][A⁺]/[R⁻A⁺][B⁺]KA/B>1:亲和力:B>AKA/B<1:亲和力:B<A(二)固定相(离子交换树脂)·离子交换树脂主要由高分子聚合物的骨架和活性基团组成,它的骨架具有特殊的网状结构1、分类·原料不同:·酚醛型·聚苯乙烯型(普遍、性质稳定、交换容量大)·环氧型·丙烯酸型·含活性基团不同:·