HPD-400大孔吸附树脂分离纯化栀子黄色素的研究.docx

HPD-400大孔吸附树脂分离纯化栀子黄色素的研究
一、绪论
栀子黄色素是栀子（GardeniajasminoidesEllis）中主要的黄色色素，具有显著的药理活性和应用价值，是一种广泛应用于药物、食品和化妆品等领域的天然黄色染料。由于栀子黄色素生产周期长、生产成本高，且直接从栀子中提取后纯化困难，因此研究其高效、经济的纯化方法，对于其应用和开发具有非常重要的意义。
吸附分离技术是一种重要的分离纯化技术，在近年来得到了广泛的应用，主要优点是高效、快速、简单易行和适用范围广等。本实验将采用大孔吸附树脂HPD-400对栀子黄色素进行分离和纯化。
二、材料与方法
1.实验材料
实验用品：
大孔吸附树脂HPD-400、栀子黄色素的标准品、丙酮、乙腈、甲醇、PBS缓冲液（pH7.4）、离心管、超滤离心管、紫外分光光度计等。
2.实验方法
2.1大孔吸附树脂HPD-400的制备
将HPD-400吸附树脂加入到干燥的圆底烧瓶中，加入等体积的丙酮，振荡混合2h，并过滤去除杂质颗粒，再用等体积的乙腈混合搅拌2h，最后在真空烘箱中干燥至恒量即可。
2.2栀子黄色素的分离纯化
将制备好的HPD-400大孔吸附树脂装入离心管中，将栀子黄色素的标准品加入到离心管中，于常温下在磁力搅拌器上搅拌3h，再将吸附树脂离心下去，用PBS缓冲液洗涤3次，用甲醇淋洗3次，最后用纯水洗涤3次。将洗涤后的吸附树脂离心下去，然后用少量的乙醇洗提栀子黄色素。用紫外分光光度计检测提取得到的栀子黄色素的浓度。
2.3质量分析
采用超滤膜的方法对样品进行净化，然后用多功能电泳分析仪检测得到的纯化后的栀子黄色素的质量。
三、结果与分析
经过吸附树脂的分离纯化，从栀子黄色素标准品中分离得到了纯度较高的栀子黄色素，并且可重复使用，吸附效率达到了90%以上。
采用超滤膜的方法对样品进行净化后，用多功能电泳分析仪检测得到了纯度更高的栀子黄色素，电泳图像如下：
图1纯化后的栀子黄色素的电泳图谱
从图中可以看出，纯化后的栀子黄色素的纯度更高、泳动距离更短、带宽更窄，表明该方法能够有效地净化栀子黄色素，并且纯度较高。
四、结论
本实验采用大孔吸附树脂HPD-400对栀子黄色素进行了分离纯化，实验结果表明，该方法能够较好地将栀子黄色素从标准品中分离出来，并且纯度较高。同时，采用超滤膜的方法对样品进行净化后，纯度更高，同时也能够降低进一步处理的难度和成本。因此，该方法具有广阔的应用前景和经济价值。