基因敲除技术及其进展.docx

基因敲除技术研究进展及其在代谢工程上的应用

TheCurrentStatusofGeneKnockoutanditsApplicationinMetabolicEngineering

天津大学化工学院
二零壹六年六月
摘要

基因敲除技术是20世纪80年代发展起来一项重要的分子生物学技术，在微生物代谢工程，动植物改造以及功能基因研究方面具有广泛的应用。本文介绍了基因敲除的策略和在代谢工程中的作用，着重介绍了四种新兴的基因敲除策略：RNAi，ZFN，TALENs以及最近研究火热的CRISPR/Cas9。并在最后展望了基因敲除技术尤其是新兴技术在相关领域的发展趋势，为基因敲除技术的进一步发展提供了参考。

关键词：基因敲除代谢工程同源重组CRISPR/Cas9

ABSTRACT
GeneKnockoutisanimportantmolecularbiotechnologywhichhasdevelopedsine1980.Ithasbeenprovedefficientinmicrobialmetabolicengineering,transformofnimalsandplantsandfunctionalgenomics.Inthisreview,wemainlyintroducedthestrategiesofgeneknockoutanditsapplicationinmetabolicengineering.AndfournewstrategiesRNAi,ZFN,TALENsandCRISPR/Cas9werehighlightedindetail.Atlast,developingfrontiersandapplicationprospectsofgeneknockoutwerefurtherdiscussed.

KEYWORDS：geneknockout,metabolicengineering,homologousrecombination,CRISPR/Cas9

目录
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TOC\o"1-3"\h\z\uHYPERLINK\l"_Toc454120557"第一章基因敲除技术 PAGEREF_Toc454120557\h1
HYPERLINK\l"_Toc454120558"1.1基因敲除相关背景 PAGEREF_Toc454120558\h1
HYPERLINK\l"_Toc454120559"1.2基因敲除技术在代谢工程中的应用 PAGEREF_Toc454120559\h2
HYPERLINK\l"_Toc454120560"第二章基因敲除策略 PAGEREF_Toc454120560\h3
HYPERLINK\l"_Toc454120561"2.1传统的基因敲除策略 PAGEREF_Toc454120561\h3
HYPERLINK\l"_Toc454120562"利用同源重组进行基因敲除 PAGEREF_Toc454120562\h3
HYPERLINK\l"_Toc454120563"利用随机插入突变进行基因敲除 PAGEREF_Toc454120563\h4
HYPERLINK\l"_Toc454120564"2.2新兴的基因敲除策略 PAGEREF_Toc454120564\h5
HYPERLINK\l"_Toc454120565"2.2.1利用RNA干扰引起的基因敲除 PAGEREF_Toc454120565\h5
HYPERLINK\l"_Toc454120566"2.2.2锌指核酸酶基因打靶技术 PAGEREF_Toc454120566\h5
HYPERLINK\l"_Toc454120567"2.2.3TALENs靶向基因敲除技术 PAGEREF_Toc454120567\h6
HYPERLINK\l"_Toc454120568"2.2.4CRISPR/CAS9基因敲除技术 PAGEREF_Toc454120568\h7
HYPERLINK\l"_Toc454120569"第三章前景展望 PAGEREF_Toc454120569\h9
HYPERLINK\l"_Toc454120570"参考文献 PAGEREF_Toc454120570\h10
HYPERLINK\l"_Toc454120571"致谢 PAGEREF_Toc454120571\h11


第一章基因敲除技术
1.1基因敲除相