检高13蛋白质和氨基酸测定.docx

北京一轻高级技术学校教案

任课教师：吴昊科目：食品检验技术编号：13
授课章

节名称第四章
第六节蛋白质和氨基酸的测定审批签字授课班级10食检（1）（2）班授课时数2授课时间第九周（1）授课方法讨论法、讲授法教具多媒体
教学目的
及要求
1、了解蛋白质测定的常用方法。
2、知道每种测定方法的原理及优缺点。
教学重点、
难点
重点：测定方法的原理和优缺点
难点：每种方法的应用与选择。作业P133
18，19
教学过程
【复习提问】

1.测定还原糖的方法有哪些？
2.淀粉测定的方法有哪些？各种方法的原理分别是什么？

【引入新课】

通过上节课的学习，同学们了解了食品中另一类重要能量物质碳水化合物的测定方法。这节课我们来共同学习蛋白质和维生素的测定。
教学后记

教案纸
教学内容、组织、教法、要求说明【新课】第六节蛋白质和氨基酸的测定
一、蛋白质的测定
蛋白质是含氮的有机化合物，分子量很大。主要由C、H、O、N、S五种元素组成。某些蛋白质中还含有微量的P、Cu、Fe、I等。
在食品和生物材料中常包括蛋白质，可能还包括有非蛋白质含氮的化合物，（如核酸、含氮碳水化合物、生物碱等；含氮类脂、卟啉和含氮的色素）。
食品和其原料中蛋白质含量的测定，主要（也是最常用的）用凯氏定氮法测定总氮量，然后乘一个蛋白质换算系数。这里也包括非蛋白的氮，所以只能称为粗蛋白的含量（但马铃薯等非蛋白氮多的要单测）。
蛋白质是生命的物质基础，人体11%~13%总热量来自蛋白质。无论动物、植物都含有蛋白质，只是含量及类型不同。
蛋白质是食品的最重要质量指标，其含量与分解产物直接影响食品的色、香、味。
蛋白质的测定方法分两大类：一类是利用蛋白质的共性即含氮量、肽键和折射率等测定蛋白质含量；另一类是利用蛋白质中的氨基酸残基、酸性和碱性基因
学生对蛋白质和氨基酸分类有简要了解

要求学生知道测定蛋白质的意义，以及测定蛋白质的主要方法。

教案纸
教学内容、组织、教法、要求说明以及芳香基团等测定蛋白质含量。
具体测定方法：
凯氏定氮法——最常用的，国内外应用普遍。
双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂法
国外：红外分析仪
氨基酸总量——酸碱滴定法测定。
各种氨基酸的分离与定量——色谱技术。
有多种氨基酸分析仪。
1、 凯氏定氮法由Kieldhl于1833年提出，现发展为常量、微量、自动定氮仪法，半微量法及改良凯氏法。书中只介绍前三种。
（1）原理
样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出。
①用H3BO3吸收后再以标准HCl溶液滴定。根据标准酸消耗量可以计算出蛋白质的含量。
②也可以用过量的标准H2SO4或标准HCl溶液吸收后再以标准NaOH滴定过量的酸。

要求学生理解测定的原理，对测定范围、测定方法、测定的具体操作步骤有简要了解。

教案纸
教学内容、组织、教法、要求说明整个过程分三步：消化、蒸馏、吸收与滴定
.消化
总反应式：
2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4—（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O
一定要用浓硫酸（98%）
<1>加硫酸钾作为增温剂，提高溶液沸点，纯硫酸沸点340℃，加入硫酸钾之后可以提高至400℃以上。也可加入硫酸钠，氯化钾等提高沸点，但效果不如硫酸钾。
<2>加硫酸铜作为催化剂。还可以作消化终点指示剂（做蒸馏时碱性指示剂）。还可以加氧化汞、汞（均有毒，价格贵）、硒粉、二氧化钛。
<3>加氧化剂如双氧水、次氯酸钾等加速有机物氧化速度。

重点掌握测定原理及每种方法的优缺点。
及每种方法使用的情况。

教案纸
教学内容、组织、教法、要求说明蒸馏消化液+40%氢氧化钠加热蒸馏，放出氨气。
吸收与滴定
<1>用4%硼酸吸收，用盐酸标准溶液滴定，指示剂用混合指示剂（甲基红—溴甲基酚绿混合指示剂）国标用亚甲基兰+甲基红。
指示剂红色绿色红色
（酸）（碱）（酸）
<2>用过量的H2SO4或HCl标准溶液吸收，再用NaOH标准溶液滴定过剩的酸液，用甲基红指示剂。
说明：
①所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。
②消化时不要用强火，应保持和缓沸腾，以免粘贴在凯氏瓶内壁上的含氮化合物在无硫酸存在的情况下消化不完全而造成氮损失
③消化时应注意不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下，并促进其消化完全。
④样品中若含脂肪较多时，消化过程中易产生大量泡沫，为防止泡沫溢出瓶外，在开始消化时应用小火加热，并时时摇动；或者加入少量辛醇或液体石蜡或硅油消泡剂，并同时注意控制热源