小鼠糖尿病模型建立的实验设计.docx

北方民族大学小鼠糖尿病模型实验设计方案
发育生物学课程设计

姓名：徐飞
学号：20103465
生物技术102班
小鼠糖尿病模型实验设计方案

徐飞
（北方民族大学生物科学与技术学院，生物技术，20103465）
【摘要】糖尿病是一种常见的具有遗传倾向的葡萄糖代谢和内分泌障碍,是由于绝对性或相对性胰岛素分泌不足引起的,近半个世纪来,糖尿病患病率和死亡率有明显上升趋势,在我国已成为继心血管疾病、肿瘤之后列第三位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病。
【关键词】糖尿病；动物模型；实验设计

【Abstract】Diabetesmellitusisacommongeneticglucosemetabolicandendocrinaldisturbancecausedbyinsulindeficiencyabsolutelyorrelatively.Inthelasthalfcentury,diabeteshastheincreasingratesofmorbidityandmortality,andhasbecomethethirdcommon,frequentlyoccurringandchronicnoninfectiousdiseaseaftercardiovasculardiseaseandcancer.
【keywords】Diabetes;Models,animal;Experimentaldesign

引言
糖尿病(diabetesmellitus,DM)属中医学“消渴”范畴,是以多饮、多食、多尿、身体消瘦,或尿浊、尿有甜味为特征的疾病。现代医学认为,糖尿病是一种由多种病因引起的慢性代谢性疾病,是由于体内胰岛素缺乏,或拮抗胰岛素的激素增高,或胰岛素在靶细胞内不能发挥正常生理作用而引起葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的综合征。为探清糖尿病病因,建立理想的DM动物模型是十分必要的,动物模型也可以筛选降糖药物,可以为中医药治疗糖尿病提供实验依据。
动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学（包括新药筛选）研究。人类疾病的发展十分复杂，以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制，推动医药学的发展来之缓慢，临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性，而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究，可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素，以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究，有助于更方便，更有效地认识人类疾病的发生发展规律，研究防治措施。
糖尿病模型的建立方法很多,如手术法、药物法、自发性DM、转基因动物法等。国外多采用自发倾向的糖尿病近交系纯种动物制作糖尿病模型,如BB(BioBreeding)鼠,DB(Dia-betes)鼠和NOD(Non--ObesityDiabetes)鼠。国内多用传统的药物法诱导急性糖尿病模型,诱导的化学药物主要为链脲佐菌素(Streptozotoein,STZ)和四氧嘧啶(AUoxan,ALX)[1]。链脉佐菌素用药量小,建模方法简便,药物毒性小,但价格昂贵,限制了其使用;[2]四氧嘧啶比较经济实惠,但建立的模型不稳定,药物毒性大,试验动物死亡率高,其剂量与给药次数及给药途径可能对动物模型的诱导有一定影响[3],另外动物体重、个体差异及外界环境条件对建模亦有较大影响。

一·实验目的
本试验通过比较四氧嘧啶与链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型的效果,探讨了建模的影响因素,以便诱导出稳定的、理想的及价廉的糖尿病动物模型。
二·实验原理
目前,大多数学者认为,STZ/四氧嘧啶加膳食诱导造成的模型相对较为可靠、稳定,造模成本比遗传性动物模型低廉,[4]四氧嘧啶(alloxan):四氧嘧啶产生超氧自由基而破坏B细胞,导致胰岛素合成减少,胰岛素缺乏。其作用可能与干扰锌的代谢有关。[5]不同种属动物对四氧嘧啶的敏感性差异很大,给药剂量依动物及给药途径不同而异,大鼠150-200mg/kg(腹腔注射),40-60mg/kg(静脉注射);小鼠200mg/kg(腹腔注射),85-100mg/kg(静脉注射)。四氧嘧啶药物价廉,血糖反应敏感,模型稳定,可用于人类T1DM的有关研究,使用时需知四氧嘧啶对动物肝肾有一定毒性作用。[6]
链脲佐菌素(STZ)是一种抗菌及抗肿瘤药物,可以对某些种属的动物(狗、兔、猴、大鼠、小鼠等)胰岛B细胞选择性破坏,而产生糖尿病。STZ导致糖尿病是由于B细胞通过葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)摄入后减少NAD+的细胞水平。从而导致B细胞坏死。外源性胰岛素抑制
GLUT2和B细胞内胰岛素的表达,可以阻止STZ的致糖尿病效果[7]。其对内脏毒性相对较小,成活率较高,是目前国内外使