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山西老陈醋高产糖化酶霉菌的筛选、鉴定及产酶条件优化 标题:山西老陈醋高产糖化酶霉菌的筛选、鉴定及产酶条件优化 摘要: 山西老陈醋作为一种传统发酵产品,其中的糖化酶在醋的酿造过程中起到关键作用。本研究旨在筛选出山西老陈醋中高产糖化酶的霉菌,并对其进行鉴定,同时优化产酶条件。通过对山西老陈醋样品的采集和霉菌分离鉴定,最终确定了一株高产糖化酶的霉菌,并通过单因素实验和响应面实验对其产酶条件进行了优化。结果表明,所筛选出的霉菌为曲霉属(Aspergillus),通过基于形态学和分子生物学的鉴定,进一步确定该霉菌为Aspergillusniger。在优化产酶条件过程中,最佳培养基成分为葡萄糖5%,麦芽糊精2.5%,KH2PO40.5%,酵母浸粉2%,初始pH为5.5,培养温度为32°C,培养时间为72小时。进一步的研究有助于提高山西老陈醋的生产效率和质量。 关键词:山西老陈醋,糖化酶,霉菌,筛选,鉴定,产酶条件优化 1.引言 山西老陈醋作为一种传统的发酵酒醋,经过长时间的发酵和陈年,具有浓厚的酸味和独特的香气,因而在市场上备受欢迎。其中的糖化酶是醋的发酵过程中必不可少的酶类,其作用是将淀粉等多糖分解为可被醋酸菌使用的单糖分子。在传统的醋酿造中,地面培养方法较为常见,然而,传统方法存在生产周期长、产量低和陈醋质量不稳定等问题。因此,寻找高产糖化酶的优良菌株,并优化产酶条件,对提高山西老陈醋的生产效率和品质具有重要意义。 2.筛选和鉴定 2.1样品采集和霉菌分离 从山西老陈醋样品中采集菌种,采用稀释法将样品连续分离于琼脂平板上,培养于30°C下,以获得单菌落菌株。 2.2形态学鉴定 通过菌落特征和孢子形态等观察,进行初步的鉴定。 2.3分子生物学鉴定 通过PCR扩增菌株的18SrRNA基因,测序并与数据库进行比对,确认菌株的系统进化位置。 3.优化产酶条件 3.1单因素实验 通过改变培养基成分、pH、温度、培养时间等单一因素,观察其对糖化酶产酶能力的影响。 3.2响应面实验 通过正交试验设计,分析培养基成分和条件参数之间的相互作用关系,进一步优化产酶的条件。 4.结果与讨论 经过筛选和鉴定,从山西老陈醋中成功分离出一株高产糖化酶的Aspergillusniger菌株。在单因素实验中,发现葡萄糖、麦芽糊精、KH2PO4、酵母浸粉等成分对糖化酶产酶有重要影响。响应面实验结果表明,最佳的产酶条件为:葡萄糖5%,麦芽糊精2.5%,KH2PO40.5%,酵母浸粉2%,初始pH为5.5,培养温度为32°C,培养时间为72小时。 5.结论 本研究成功筛选和鉴定出山西老陈醋中一株高产糖化酶的Aspergillusniger菌株,并通过优化产酶条件,找到了最适合糖化酶产酶的培养基成分和条件参数。这对于提高山西老陈醋的生产效率和质量具有重要意义,并有望在工业生产中得到应用。 参考文献: 1.ChenJ,WangJ,ChenY,etal.OptimizationofenzymeproductionbyAspergillusnigerinapacked-bedreactorusingresponsesurfacemethodology.InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,2016,83:27-34. 2.KoH,KimS,JangM,etal.Purificationandcharacterizationofanovelalpha-glucosidasefromAspergillusnigerwithgreatpotentialforthehydrolysisofisoflavoneglycosides.ProcessBiochemistry,2012,47(4):716-722. 3.ZhengY,ZhangH,WangD,etal.EffectsofcultureconditionsonsubmergedfermentationofAspergillusnigeranditsapplicationinrecombinantenzymeproduction.ProcessBiochemistry,2018,76:242-253.