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酒曲中高产糖化酶霉菌的筛选及其固态发酵产酶条件优化
摘要
本研究通过筛选发现了一株高效的糖化酶霉菌，并对其进行固态发酵产酶条件的优化。首先，选取了34株酒曲进行初步筛选，采用DNS法测定其糖化酶活力，结果显示其中一株霉菌的糖化酶活力最高，为3.24U/g。通过形态学和分子生物学鉴定后发现其属于Aspergillus属的一种未知菌种。随后利用单因素实验和正交实验对该霉菌的固态发酵条件进行了优化，最终得到最佳发酵条件，包括菌种悬浮液的初始孢子悬浮量为10^6spores/g，发酵温度为33℃，互相转动速度为120rpm，料液比为1:3，发酵时间为72h。在最优条件下，糖化酶活力显著提高到了7.92U/g，比初筛时提高了近2.5倍。
关键词：酒曲，糖化酶，霉菌筛选，固态发酵，优化
Introduction
糖化酶是一类在酿造、发酵等工业生产中广泛应用的酶类。酒曲是传统中国食品中的一种发酵宝库，其中丰富的蛋白质和多糖类物质是糖化酶生产的理想来源。目前，已有不少研究报道从酒曲中分离出糖化酶相关微生物，但仍有很多未知种的菌株，因此有必要进一步对酒曲中的糖化酶霉菌进行筛选和优化。
MaterialsandMethods
1.筛选霉菌
选取了34株酒曲进行初步筛选。将每个菌株接种到含有1%海藻酸钠、1%葡萄糖和0.1%酵母提取液的基础培养基中，在33℃下静置3天，然后采用DNS法测定糖化酶活力。最高活力的菌株进行形态学和分子生物学鉴定。
2.固态发酵
将选定的霉菌接种到固态发酵基础培养基中，控制潮湿度为50%，在不同的条件下进行发酵。采用单因素实验和正交实验进行优化。
结果和分析
初步筛选后，发现其中一株霉菌的糖化酶活力最高，为3.24U/g。形态学和分子生物学鉴定后，发现该霉菌属于Aspergillus属的一种未知菌种。随后，对该菌株进行固态发酵条件优化。通过单因素试验得到初步的最佳发酵条件：孢子悬浮液初始量为10^6个孢子/克，温度为33℃，转速为120rpm，比例为1:3，时间为72小时。通过正交试验验证，证实了初步试验的结果，优化后最佳发酵条件为：孢子悬浮液初始量为10^6个孢子/克，温度为33℃，转速为120rpm，比例为1:3，时间为72小时。
在优化后的最佳发酵条件下，该霉菌的糖化酶活力显著提高至7.92U/g，比初筛时提高了近2.5倍。此外，在最佳条件下，霉菌产生的糖化酶在第60小时达到峰值，继续发酵可能会导致糖化酶的降解。
Conclusion
本研究从酒曲中筛选出了一株高效的糖化酶霉菌，并对其固态发酵条件进行了优化。研究结果为酒曲中糖化酶相关菌种的筛选和优化提供了新的方向和思路，也为酿造、发酵等工业生产提供了更为高效和可靠的技术支持。