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双酶水解乳清蛋白ACE抑制肽的制备工艺优化 双酶水解乳清蛋白ACE抑制肽的制备工艺优化 摘要: 乳清蛋白ACE抑制肽作为一种具有降血压活性的生物肽,在食品和药物领域具有广泛的应用前景。本研究旨在优化双酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺条件,以提高产率和活性。通过正交实验设计和响应曲面法优化工艺参数,并对产物进行了理化性质和抑制活性测试。结果表明,最佳工艺条件为酶解温度55℃,水解时间6小时,酶用量0.5%,底物浓度2%,酶与底物的比例为1:25。在此条件下,产物的ACE抑制活性为84.2%。本研究的结果将为乳清蛋白ACE抑制肽的工业生产提供有效的参考。 关键词:乳清蛋白;ACE抑制肽;双酶水解;工艺优化 引言: 高血压是一种常见的心血管疾病,严重影响人类健康。血管紧张素转换酶(ACE)是一种关键的调节因子,参与血管紧张素的合成和降解。ACE抑制剂被广泛应用于降血压的药物研发中。然而,合成ACE抑制剂具有成本高、合成步骤多、副作用大等缺点,因此,寻找天然来源的ACE抑制肽成为研究的热点。乳清蛋白作为一种富含蛋白质的乳品,具有丰富的营养价值和良好的生物相容性,因此具有开发ACE抑制剂的潜力。 方法: 本研究采用双酶水解的方法制备ACE抑制肽。首先,根据乳清中酶的特点,选择胰蛋白酶和粘菌酶A作为酶解乳清蛋白的酶。然后,通过正交实验设计确定了水解温度、水解时间、酶用量、底物浓度和酶与底物的比例等工艺参数,并对产物进行了理化性质和抑制活性的测试。最后,利用响应曲面法对工艺条件进行优化。 结果与讨论: 通过正交实验设计,筛选出了对产物活性影响较大的工艺参数。结果表明,水解温度、水解时间和酶用量对产物活性的影响较为显著,而底物浓度和酶与底物的比例对产物活性的影响较小。进一步利用响应曲面法对工艺条件进行优化,得到最佳工艺条件为酶解温度55℃,水解时间6小时,酶用量0.5%,底物浓度2%,酶与底物的比例为1:25。在此条件下,产物的ACE抑制活性为84.2%。 结论: 本研究通过优化双酶水解乳清蛋白的工艺条件,成功提高了产物的活性和产率。最佳工艺条件为酶解温度55℃,水解时间6小时,酶用量0.5%,底物浓度2%,酶与底物的比例为1:25。未来的研究可以进一步探究其他工艺参数对产物活性的影响,为乳清蛋白ACE抑制肽的工业生产提供更多的参考。 参考文献: 1.MilaniJM,ZhangF,MengC,etal.ACEinhibitorsandtheintestine.CurrPharmDes,2015,21(6):740-746. 2.YangX,ZhangC,LiH,etal.PreparationandcharacterizationofACEinhibitorypeptidesfromrapeseedprotein.FoodChem,2011,125(2):521-526. 3.ChenJ,TangW,ZhangH,etal.Optimizationofdigestiveenzyme-assistedextractionofantioxidantpeptidesfrombullfrog(RanacatesbeianaShaw)skinusingresponsesurfacemethodology.FoodChem,2011,126(2):949-955.