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马齿苋内生菌分离及其抑菌效果研究 一、引言 马齿苋是一种常见的野菜,具有营养丰富、味美清香等特点。近年来,研究发现马齿苋中存在多种内生菌,这些内生菌不仅对马齿苋生长发育具有重要作用,还可能在植物保护方面具有一定的应用价值。本文通过分离马齿苋中的内生菌,并对其抑菌效果进行研究,以期为植物保护提供新思路和方法。 二、材料与方法 1.材料 (1)样品:采集自北京地区的野生马齿苋样品; (2)培养基:采用常规的菌落计数培养基; (3)试验菌株:在马齿苋样品中分离得到的内生菌株。 2.方法 (1)样品处理:将采集的样品随机化分成多份,进行消毒处理后,制成不同浓度的悬液,用于进行分离内生菌。 (2)内生菌分离 a.选取最细嫩的马齿苋叶片,进行消毒处理。大约15g马齿苋叶片放入1L的无菌水中,在摇床上摇动20次/分,30min后放置1h; b.取出叶片,晾干后在花生油中涂抹; c.将叶片切成小段,分别用铅笔芯和火柴棒分别擦拭,使叶表面的微生物向下降落; d.将处理后的叶片放入选用的菌落计数培养基中,培养48h后进行分离,用宏观和微观的方法进行鉴定。 (3)抑菌效果测定 将菌株分别接种于平板上,待菌落生长到相应的大小后,在菌落生长的平板上点涂不同浓度的试验品。在点涂后,将菌落培养继续进行48h后,观察试验品对菌落生长的抑制效果。抑菌效果的测试可采用透明圆形对比量法进行。 三、结果与分析 1.样品处理 (1)消毒处理后,样品中各种杂菌均得到了有效抑制; (2)将样品制成悬液后,分别进行内生菌的分离工作,共计分离到了5个内生菌株。 2.内生菌分离 (1)对分离的5个内生菌株鉴定后,发现它们均为细菌,分别为芽孢杆菌、沙门氏菌、霉菌、放线菌和链球菌。 (2)对这些内生菌进行抑菌效果的测试后,发现芽孢杆菌和沙门氏菌对其他细菌具有较强的抑制效果,其中芽孢杆菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果最为显著。 四、结论 本文成功从马齿苋中分离到5种内生菌株,并通过抑菌实验发现,芽孢杆菌和沙门氏菌具有较强的抑菌作用,这些内生菌株可能成为马齿苋的天然生物制剂。这些发现为植物保护提供了新思路和方法。但需要进一步的深入研究,在真正推广应用时需要考虑目标植物的适应性和可能的副作用。