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喜树内生真菌的分离及其对植物病原菌的抑菌活性研究
摘要
随着人们对天然植物资源的重视和需求的增加，内生真菌的研究受到了越来越广泛的关注。本研究从喜树中分离获得7株内生真菌，并通过形态特征和ITS序列比对，鉴定为3个属，分别是Penicillium、Aspergillus和Fusarium。用平板法筛选方法测定了7株内生真菌对5种植物病原菌的抑制率，结果表明，7株内生真菌对5种植物病原菌均具有不同程度的抑菌活性，其中Fusariumsolani的抑制率最高，达到94.7%。本研究结果为喜树内生真菌的资源开发和应用提供了基础数据，同时也为绿色防控农业病害提供了新思路。
关键词：喜树；内生真菌；分离；鉴定；抑菌活性
Abstract
Withtheincreasingattentionanddemandfornaturalplantresources,thestudyofendophyticfungihasreceivedmoreandmoreattention.Inthisstudy,7endophyticfungiwereisolatedfromtheChineseparasoltree(Firmianasimplex),andidentifiedasthreegenera,includingPenicillium,Aspergillus,andFusarium,bymorphologicalcharacteristicsandITSsequencealignment.Theinhibitionratesofthe7endophyticfungiagainst5plantpathogensweredeterminedbytheplatemethod,showingthatall7fungalstrainshaddifferentdegreesofinhibitionactivitiesagainstthe5plantpathogens,withthehighestinhibitionrateof94.7%againstFusariumsolani.TheseresultsprovidebasicdataforthedevelopmentandapplicationofendophyticfungifromChineseparasoltreeandalsoprovidenewideasforthegreencontrolofagriculturaldiseases.
Keywords:Chineseparasoltree;endophyticfungi;isolation;identification;inhibitionactivity
1.引言
内生真菌是一类在植物或藻类体内生活的真菌，对植物的生长发育和抗病能力具有重要影响。近年来，随着对生物多样性和生态系统功能的认识不断加深，内生真菌的研究也逐渐得到了重视。喜树是我国特有的生态树种，在广泛的分布区域内，被广泛应用于节水、防沙、美化环境等方面。然而，喜树上的内生真菌的种类和生物活性尚未得到深入研究。因此，本研究旨在从喜树中分离获得内生真菌，并评估其对几种常见植物病原菌的抑菌活性。
2.材料与方法
2.1样品采集与处理
本研究所选取的喜树样品采自北京市市区公园内，收集样品采自树干基部，经酒精、氯仿表面消毒后，取样品表层7~10mm，约重2g，切成小块后接种到PDA固体培养基中（pH5.5），在25±1℃下培养3天后可见真菌生长，经过观察筛选后，分离获得7株内生真菌。
2.2真菌鉴定
从7株内生真菌分生出的菌丝切片，进行显微镜观察和摄影，判断其形态特征，包括孢子形态、生长速率、菌落形态等，并通过ITS序列比对分析，鉴定真菌属种。
2.3抑菌活性测定
用平板法测定7株内生真菌对植物病原菌的抑制率，选取5种常见的植物病原菌，分别为Fusariumsolani、Alternariaalternata、Colletotrichumlindemuthianum、Botrytiscinerea和Phytophthorainfestans。选取YS平板培养基，分别与植物病原菌接种，制成与直径约8mm的细胞悬液，接种在YS平板培养基上，培养24h，在中央位置切一个小圆洞，吸取内生真菌悬液，涂抹在小圆洞周围，按照相应处理组培养，4天后计算抑制率。
3.结果与分析
3.1内生真菌分离与鉴定
本次研究从喜树样品中分离获得7株内生真菌，根据形态特征和ITS序列比对鉴定，这7株内生真菌属于3个属，分别为Penicillium（2株）、Aspergillus（3株）和Fusarium（2株），具体分布见表1。
3.2抑菌活性测定
采用平板法测定7株内生真菌对5种植物病原菌的抑制率，结果见表2。7株内生真菌均