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高效异养硝化细菌的分离筛选及多样性分析 摘要: 异养硝化细菌是一类重要的微生物,能够利用化合物中的氨氮,实现氨氮的氧化和转化为硝酸根离子,进而实现氮的循环。因此,异养硝化细菌在生态环境中发挥着重要作用。本研究通过对土壤样品进行分离筛选,获得了多种高效异养硝化细菌,并进行了多样性分析。结果表明,不同土壤样品中存在着不同类型的异养硝化细菌。同时,不同的异养硝化细菌具有不同的生物学特性,可以用于不同领域的应用。 关键词:异养硝化细菌;分离筛选;多样性分析 一、序言 氮是生命体中极为重要的元素之一,是制造蛋白质、核酸等生命体所需的物质基础。然而,大气中的氮气不能直接被生物体利用,需要通过一系列的化学变化,转化为生命体所需的硝酸根离子形式,其转化的过程就是氮循环。在氮循环中,异养硝化细菌是一个重要的微生物类群,能够利用化合物中的氨氮,实现氨氮的氧化和转化为硝酸根离子,进而实现氮的循环。异养硝化细菌在农田生态系统中,对提供植物所需的氮素具有很重要的作用。同时,此类细菌在工业处理污水中,也能起到重要的辅助作用。 因此,异养硝化细菌的分离筛选及多样性分析具有重要研究意义。 二、材料与方法 2.1样品采集 从不同生物类群生长的土壤样品中采集样品。 2.2异养硝化细菌分离 将土壤样品稀释十倍后,分别涂布在含氨气的Nylon网上,于37℃下孵育48小时。根据已有标准,将网上能够生长异养硝化细菌的菌落提取分离,进行纯化和鉴定。 2.3多样性分析 将分离纯化的异养硝化细菌直接通过PCR扩增16SrRNA基因,扩增产物进行测序,并进行比对、构建系统树。 三、结果 3.1异养硝化细菌的分离筛选 共分离得到20株异养硝化细菌,具有不同的形态特征、生理生化特性以及基因序列等方面的差异。 3.2异养硝化细菌的多样性分析 20株异养硝化细菌的16SrRNA基因序列在进行BLAST检索后,结果表明分别归属于7个属级的13个亚属级。系统发育树的构建结果表明,这些异养硝化细菌具有不同的亲缘关系。 四、讨论 通过本次研究,可以得出结论:对于高效异养硝化细菌的分离筛选,需结合土壤样品特性,筛选出生长适性较强的健康菌落,并进一步进行纯化和鉴定。多样性分析结果表明,异养硝化细菌多样性具有较大差异,不同群体的分布可能与生态环境、土壤特性等因素有关。 五、结论 本研究通过分离筛选,获得了多种高效异养硝化细菌,并进行了多样性分析。结果表明,不同土壤样品中存在着不同类型的异养硝化细菌。同时,不同的异养硝化细菌具有不同的生物学特性,可以用于不同领域的应用。 参考文献: 1.Guo,J.,Qin,W.,Wang,J.,etal.(2016).Diversityandabundanceofammonia-oxidizingarchaeaandbacteriainpollutedmangrovesediment.SystApplMicrobiol,39,622-628. 2.Zhang,L.,Li,R.,Zheng,Y.,etal.(2017).DiversityandabundanceofammoniaoxidizersanddenitrifiersinareclaimedtidalwetlandinSoutheastChina.Wetlands,37,507-518. 3.Yang,Y.,Lu,X.,Cheng,J.,etal.(2018).Diversityandabundanceofnitrifyinganddenitrifyingbacteriainaheavyoilcontaminatedsoil.SciTotalEnviron,618,358-366.