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异养硝化细菌的分离纯化和脱氮性能研究的综述报告 异养硝化细菌(heterotrophicnitrifyingbacteria,HNB)是一类能够在无氧或微氧条件下利用于有机物质代谢的异养菌类,同时具有硝化作用,能够将有机氮转化为无机氮,进而完成脱氮过程。其对于废水处理等环境工程具有重要作用。本文就HNB的分离纯化及其脱氮性能研究进行综述,内容涵盖了HNB分类、分离纯化方法、脱氮性能及其应用等方面。 一、HNB分类 HNB属于原核生物,它们属于扩展的Pseudomonadale目中的类异养硝化钟形菌科(Xanthomonadaceae)、类异养硝化肉桂菌科(Chromatiaceae)和类异养硝化杆菌科(Alcaligenaceae)。其中,类异养硝化钟形菌科的菌种种类最多,肉桂菌科次之,杆菌科最少。 二、HNB分离纯化方法 HNB的分离、纯化方法有两种:传统方法和分子生物学方法。 (1)传统方法 传统方法主要采用菌落计数、磷酸盐缓冲液成分、分析方法和转移方法等步骤,进行HNB的分离纯化。菌落计数将液体培养基上的单个细胞分离,再利用稀释的菌液计数,以获得可进行实验或处理的足够量的个体细胞。磷酸盐缓冲液成分是一项关键步骤,对实验结果至关重要。而分析方法主要是为了验证分离到的细菌是否为异养硝化细菌,主要通过硝化反应来初步鉴定。转移方法则是将菌液转移到含有不同碳源和氮源的液体培养基上,对不同的菌种进行分类。 (2)分子生物学方法 分子生物学方法可以通过扩增分离到的细菌的特定基因或者结构物进行鉴定和定位。PCR扩增法、DGGE和T-RFLP等分子生物学方法常用于HNB的分离和纯化,以获得特定的脱氮菌群。 三、HNB脱氮性能研究 HNB的脱氮效果与其菌种、氧浓度等因素有关。Beccarietal.(2010)研究发现,HNBPseudomonassp.LY中的NO2/NH4+比值最高时,脱氮效果最佳,反之则脱氮效果较差。Schmidtetal.(2003)则将HNB与好氧硝化细菌(nitrifyingbacteria)结合使用,发现在有机物、硝酸盐、氨和磷的共存条件下,可以高效地脱氮。 四、HNB应用 HNB可以被应用于废水、垃圾场渗滤液、环境污染物的去除等领域。如,一些研究人员在处理垃圾场渗滤液方面,使用了含有HNB的生物膜反应器,实现了高效的脱氮效果。在城市污水处理中,HNB也可与好氧厌氧结合使用,获得较高效率的脱氮效果。 综上所述,HNB是一类重要的异养菌类,具有硝化作用和脱氮能力。其分离纯化方法可采用传统方法和分子生物学方法,脱氮效果受细菌菌种、氧浓度等因素影响,可在废水、垃圾场渗滤液、环境污染物处理中应用,具有很好的应用前景和发展潜力。