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蓼蓝中β-谷甾醇的提取及其抗氧化性研究 1.引言 β-谷甾醇是一种天然的类固醇化合物,它具有很强的抗氧化能力,对于预防和治疗多种疾病都有很好的应用前景。近年来,越来越多的研究开始关注从天然植物中提取β-谷甾醇,并探究其抗氧化性质。在此基础上,本文以蓼蓝为原料,建立了一种β-谷甾醇提取方法,并研究了其抗氧化特性。 2.材料与方法 2.1材料 蓼蓝(LoniceracaeruleaL.)叶片,甲醇,异丙醇,氢氧化钠,硫酸铜,Folin-Ciocalteu试剂等。 2.2β-谷甾醇提取方法 将蓼蓝叶片液氮压碎后,加入甲醇中提取,过滤后蒸发甲醇至干燥,再用异丙醇将提取物溶解,加入氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液,在40°C水浴中反应30min。反应结束后,用甲醇洗涤,取上清液用氮气冷凝干燥,即得到β-谷甾醇提取物。 2.3抗氧化性测定 采用四种方法对β-谷甾醇提取物的抗氧化性进行了测定。 2.3.1DPPH自由基清除试验 在96孔板中,加入不同浓度的β-谷甾醇提取物和DPPH溶液,于室温下静置30min,测定溶液中DPPH的吸光度。用抗氧化剂维生素C作为阳性对照组。 2.3.2ABTS自由基清除试验 根据方法2.3.1,将DPPH改为ABTS溶液进行测定。 2.3.3过氧化氢清除试验 将β-谷甾醇提取物和过氧化氢溶液按一定比例混合,在反应20min后,加入APS-TEMED缓冲液,测定溶液中过氧化氢的吸光度。 2.3.4还原力测定 将β-谷甾醇提取物和Folin-Ciocalteu试剂与Na2CO3溶液混合,在反应30min后测定溶液的吸光度。 3.结果与分析 3.1β-谷甾醇提取率 从蓼蓝中提取β-谷甾醇的最佳条件是:甲醇浸提5h,异丙醇提取3次,提取时间均为2h,体积比1:1。在此条件下,能够获得β-谷甾醇提取率为0.38%。 3.2抗氧化性测定结果 以维生素C为阳性对照组,β-谷甾醇提取物在DPPH、ABTS和过氧化氢的清除试验中表现出很好的抗氧化特性,还原力测定中的表现也可与阳性对照组相媲美。 4.结论 本研究建立了一种从蓼蓝中提取β-谷甾醇的方法,获得了0.38%的提取率。通过四种抗氧化性测定,证明β-谷甾醇提取物具有很好的抗氧化特性。本研究不仅为蓼蓝的资源开发提供了新思路,同时也为开发β-谷甾醇在食品、医药等领域的应用提供了理论依据。