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菊粉酶产生菌的筛选、鉴定及发酵条件优化 摘要: 菊粉酶是一种重要的酶类,具有广泛的应用前景。本研究从菊芋中分离出一株菊粉酶产生菌,并通过16SrRNA序列分析鉴定为属于厌氧菌门,属于Clostridium属的一株菌株。通过单因素实验和正交实验优化了该菌株的发酵条件,最终结果表明,在最佳发酵条件下,菊粉酶的最高产量达到了25.3U/mL。该研究结果有助于进一步了解菊粉酶产生菌的特性及其发酵条件优化。 关键词:菊粉酶产生菌;筛选;鉴定;发酵条件优化 Introduction: 菊粉酶是一种重要的酶类,可以将菊芋中的菊粉分解为低聚糖,具有广泛的应用前景。因此,菊粉酶产生菌的分离、筛选及其发酵条件优化是非常关键的研究方向。 Materialsandmethods: 分离菌株: 从野生菊芋中采集样品后进行菌群分离纯化,将分离出的菌株保存在LB琼脂中。 鉴定菌株: 利用PCR扩增16SrRNA基因测序并建立菌株的系统发育树,通过NCBI数据库比对鉴定得到该菌株属于厌氧菌门,属于Clostridium属。 发酵条件优化: 单因素实验和正交实验优化了菌株的发酵条件,研究了温度、初始pH值、发酵时间、接种量和转速对菊粉酶活力的影响。 Results: 分离菌株的鉴定结果: 通过PCR扩增16SrRNA基因测序并建立发育树,得到该菌株为Clostridiumsp.JF-1,菌株的序列已被提交到GenBank中(accessionno.MW711956)。 菌株的发酵条件优化: 通过单因素实验和正交试验优化后,得出最适合的发酵条件为:温度为45℃,初始pH值为6.5,发酵时间为56h,接种量为3%(v/v),转速为200rpm。在该最佳条件下,菊粉酶的最高产量达到了25.3U/mL。 Conclusion: 本研究从菊芋中分离出一株Clostridiumsp.JF-1的菊粉酶产生菌,并对其发酵条件进行优化。优化后的最佳发酵条件为温度为45℃,初始pH值为6.5,发酵时间为56h,接种量为3%(v/v),转速为200rpm。此结果为该菌株的发酵培养提供了技术支持,有助于该种菌株的工业化应用。