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细胞工程简介 【必背内容】 1.细胞的全能性 ①概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 ②全能性大小:受精卵﹥生殖细胞﹥体细胞 ③全能性原理:生物体的每一个细胞(动物:细胞核)都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所需的全部基因。 ④生物体内的细胞没有表现出全能而是分化成不同的组织、器官,是由于基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。 ⑤植物细胞表现全能性的条件a.离体状态b.一定的营养物质(矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物)和植物激素(细胞分裂素和生长素)c.其它外界条件(适宜的温度、pH等) 2.植物组织培养 过程:离体的植物器官、组织或细胞经脱分化(去分化)培养成愈伤组织,经再分化 形成具有根、芽结构的胚状体,发育成试管苗,移栽到地里发育成完整的植物体。 愈伤组织细胞的特点:排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 应用:快速繁殖、培育无病毒植株;生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等;生产人工种子;用于植物体细胞杂交及转基因植物的培育。 3.植物体细胞杂交 植物体细胞杂交是将两种植物的体细胞融合形成杂种细胞,但最终要培育成杂种植株。 植物细胞用纤维素酶、果胶酶去掉细胞壁后的部分叫原生质体。人工诱导原生质体融合的方法有:物理方法是离心、振动、电刺激;化学方法是用聚乙二醇(PEG)等诱导剂。 植物体细胞杂交作为育种方法的优点是:克服远源杂交不亲和的障碍。 4.动物细胞工程的技术手段有:动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。 5.动物细胞的培养 ①培养细胞的来源:动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织(这类细胞中有些细胞具有较强的分裂能力) ②培养液必需成分:水、葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐和动物血清。 ③工具酶:胰蛋白酶(第一次目的使组织分散成单个细胞,后来的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来) ④培养过程中:10代以前叫原代培养,10代以后叫传代培养;10代~50代的细胞叫细胞株,50代以后的细胞叫细胞系(遗传物质发生了改变,并且有癌变的特点)。 ⑤应用:生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等蛋白质生物制品,培养动物组织用于器官移植、药物生物病理以及药物毒理研究等。 6.动物细胞融合诱导剂:灭活的仙台病毒(利用病毒的感染性和融合性)、PEG等。 7.单克隆抗体 ①单克隆抗体:通过细胞克隆而获得的化学性质单一、特异性强的抗体。 ②制备过程中:所选材料是小鼠骨髓瘤细胞和经过免疫的小鼠脾脏中获得的效应B淋巴细胞;杂交瘤细胞的特点是既能分泌特异性抗体又能在体外大量增殖;第一次筛选是在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选是为了获得能产生特定抗体的细胞群;杂交瘤细胞可在体外培养或在小鼠体内培养。 ③应用:疾病诊断、治疗和预防(与常规抗体相比特异性强,灵敏度高),如单克隆抗体诊断盒、“生物导弹”。 8、生物体的每一个细胞都有含有该物种的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 9、在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织器官,这是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。 10、植物细胞只有脱离了植物体,在一定的外部因素的作用下,经过细胞分裂形成愈伤组织,才能表现出全能性,由愈伤组织细胞发育分化出新的植物体。 11、植物体细胞杂交的过程,实际上是不同植物体细胞的原生质体的融合的过程。 12、植物体细胞杂交克服了远源杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 13、细胞株细胞的遗传物质没有发生改变。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变,并且带有癌变的特点,有可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称为细胞系。 14、动物细胞融合最重要的用途是制备单克隆抗体。 15、在单抗上连接抗癌药物,制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞,又不会伤害健康细胞 【查漏补缺】 细胞工程是指应用和的原理和方法,通过某种工程学手段,在或上,按照人们的意愿来细胞内的或获得的一门综合科学技术。包括植物细胞工程和动物细胞工程。前者理论基础是,其技术手段包括和植物体细胞杂交;动物细胞工程的技术手段有:动物细胞、动物细胞、、移植、移植等,其中,是其他技术的基础。动物细胞融合技术最重要的用途是制备。 (一)植物细胞工程:科学研究表明,当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于状态时,在一定的、和的作用下,就可能表现出,发育成。科学家们用植物的方法,已经把许多种植物的离体的器官、组织或细胞,培养成了完整的植物体。 1、植物组织培养 离体的植物器官、组织或细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞,形成。愈伤组织的细胞排列,是一种高度的呈无定形状态的细胞。由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,