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血型和交叉配血 ABO血型和RH血型是红细胞的2大血型抗原抗体系统,在输血和血液遗传学研究有重大的意义。一、ABO血型系统(一)ABO血型系统抗原 1.ABO血型系统的组成和遗传是存在于RBC膜上的一种糖蛋白,有多肽和糖链组成。A和B基因是显性基因,O基因是隐性基因,由A,B基因调控。 2.ABO血型系统抗原的分布A、B、H抗原存在于RBC膜上,也分布于WBC,PLT及其他组织细胞上。 血型物质:组织细胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多为半抗原,主要存在于体液和分泌物中,以唾液中最为丰富。 分为分泌型和非分泌型。 血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以协助鉴定ABO血型和预测胎儿的血型。(二)ABO血型系统抗体 分为天然抗体和免疫性抗体。 天然抗体主要为IGM型抗体。 免疫性抗体主要为IGG型抗体。(三)ABO血型系统亚型 A抗原主要亚型:A1和A2,中国以A1亚型为主。B亚型较少见,抗原性较弱。 二、ABO血型鉴定正向定型:用已知的特异性血清检查红细胞的未知血型抗原。 反向定型:用已知的标准红细胞检查标本中未知血型抗体。 方法: 盐水凝集法:检测IGM型抗体。 2.凝胶微柱法方法学评价: 1.盐水凝集法 分为玻片法和试管法。简单易行。 2.凝胶微柱法 重复性好,特异性灵敏性高,全自动分析仪可以减少人为误差。缺点:成本高,需要特殊设备。质量保证: 1.标准血清:在有效期内使用,效价高,凝集力强,严防污染。常用的有: A、人血清ABO血型抗体:特异性高,凝集效价:抗A不低于1︰128,抗B不低于1︰64,亲和力在15秒出现凝集,3分钟明显凝集,稳定性高,灭活补体。 B、人ABO单克隆抗体:特异性,亲和力,凝集效价,稳定性高。2.被检红细胞: A、标本新鲜,严防污染。 B、特殊病人标本,加做对照及正反定型,以及用洗涤红细胞做血型鉴定。 3.实验器材:清洁干糙,应正反定型,时间温度离心时间均应该严格控制。观察结果仔细,注意出现弱凝集现象,必要时在显微镜下观察结果。 4.综合分析实验结果。核实无误时方可以发出检查结果。临床意义: 1.输血 2.器官移植 3.新生儿溶血病 4.其他三、Rh血型系统(一)Rh血型系统的命名 1.Fisher-Race命名法(CDE命名法) A、遗传基因位于1号染色体短臂上的连锁基因,每条有三个基因位点,依次排为CDE。 B、各基因位点由一对等位基因组成。CCDE以复合体的形式遗传D可有8种基因组合和36种遗传型。2.ISBT命名法。 3.Rh血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无D抗原为Rh阳性和Rh阴性。 (二)Rh血型系统抗原及抗体 1.Rh血型系统抗原仅次于ABO血型系统的A、B抗原。与人类密切的是D、E、C、c、e。 2.Rh血型系统抗体天然抗体极少,由输血或妊娠刺激产生的IGG型免疫性抗体。以抗D最为常见。(三)Rh血型鉴定 常用方法有酶介质法,低离子强度溶液试验,抗人球蛋白试验,凝集胺试验及人源盐水介质抗D试验。 检测原理 1.酶介质法:用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸,降低红细胞表面的负电荷,减少排斥力,促进Rh抗原与抗体的结合而产生红细胞凝集。2.聚凝胺试验:聚凝胺是带高价阳离子的季胺盐,有利于红细胞凝集。由Rh抗体致敏的红细胞产生凝集是特异性的不可逆凝集,非抗体致敏的凝集为可逆性凝集。 3.抗球蛋白试验(CoombsTest):是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体,出现特异性凝集。 4.人源盐水介质抗D试验:利用免疫球蛋白变性剂处理,使IGG变为IGM类抗体,能在盐水介质中发生凝集现象,用于快速鉴定。 5.低离子强度溶液试验 方法学评价质量保证 1.检测前:标本新鲜,严防污染,被检红细胞用生理盐水洗涤。试剂器材要在有效期内的合格试剂,器材清洁干燥。 2.检测中: A、严格遵守操作规程。 B、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温度以及离心条件等关键因素。 C、每次均需阴性阳性和试剂对照。 D、观察结果不可用力震摇,结果可疑用显微镜观察确认。 3.检测后:复查实验全过程,填写报告并于4度保存标本一周以上。 临床意义 1.Rh血型鉴定及交叉配血 2.新生儿溶血病的诊断四、交叉配血 交叉配血实验是在现象鉴定的基础上,进一步检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分。主侧:受血者血清与供血者红细胞;次侧:受血者红细胞与供血者血清。 检测原理 常用盐水配血试验。方法学评价质量保证 1.检测前: A、建立标本签收制度。 B、标本新鲜,无溶血,严防污染,有输血或妊娠史的应在48小时内留取。 C试剂器材要在有效期内的合格试剂。 D、器材清洁干燥,严防溶血。2.检测中: A、高度责任感。 B、器材标记清楚,吸管等均