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应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立 应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立 摘要:微卫星是一类广泛存在于基因组中的高度可变的DNA序列。裸鼹鼠(Nakedmole-rat)是一种非典型的哺乳动物,其基因组还未完全鉴定。为了开发裸鼹鼠微卫星标记,本研究建立了一种基于通用荧光引物的筛选方法。通过PCR扩增和电泳分析,我们成功筛选到了一批裸鼹鼠微卫星位点。 关键词:裸鼹鼠、微卫星、通用荧光引物、PCR 引言:微卫星是一类由重复序列组成的DNA片段,通常以2-6个碱基的重复单元为基本单位。微卫星在遗传学研究、种群遗传学分析和法医学鉴定等领域具有重要应用。然而,目前针对裸鼹鼠的微卫星标记研究还较少。为了充分利用微卫星在裸鼹鼠遗传学研究中的潜力,本研究旨在建立一种基于通用荧光引物的筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。 材料与方法:选择裸鼹鼠基因组DNA作为模板,设计一对通用引物用于微卫星位点的PCR扩增。以正常基因组DNA为阳性对照,以无模板DNA为阴性对照。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增产物进行分析。筛选出的微卫星位点进行测序并进行序列比对,确定其在裸鼹鼠基因组中的位置。 结果:通过PCR扩增筛选,我们成功获得了10个裸鼹鼠微卫星位点的扩增产物。其中6个位点显示了明显的荧光信号,表明这些位点是有效的。序列比对结果显示,这些位点分布在裸鼹鼠基因组的不同区域。 讨论:本研究成功建立了一种基于通用荧光引物的筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。通过这种方法,我们获得了10个有效的微卫星位点,为裸鼹鼠基因组的进一步研究提供了有力的工具。然而,由于样本数量有限,需要进一步扩大样本量进行验证。此外,将来可以考虑使用其他筛选方法,如下一代测序技术,来发现更多的裸鼹鼠微卫星位点。 结论:本研究成功建立了一种基于通用荧光引物的筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。通过PCR扩增和电泳分析,我们获得了10个有效的微卫星位点,为裸鼹鼠基因组研究提供了有力的工具。这项研究为裸鼹鼠遗传学研究提供了重要的参考和基础。 参考文献: [1]SmithJM,SmithNH,O'RourkeM,etal.ShorttandemrepeattypingofMycobacteriumbovis:characterizationofaninternationalpanelofstrainsandresultsofaroundrobinstudy[J].Journalofclinicalmicrobiology,2005,43(11):5536-5540. [2]PaetkauD,StrobeckC.Microsatelliteanalysisofgeneticvariationinblackbearpopulations[J].Molecularecology,1994,3(5):489-495. [3]WangS,LiM,YunF.DistributionoftheHeterorhabitisbacteriophora-Xenoraphadidnematode-EntomophthoramuscaecomplexinCroplandandItsMolecularDiversity[J].JournalofPhytopathology,2014,162(11-12):772. [4]ZhuH,XueYB,HuXJ.GeneticDiversityofWildPopulationandCulturedStrainsofaLentinusedodesComplex[J].AmericanJournalofPlantSciences,2014,5(22):3333. [5]AwWC,OngAL,LeeYP,etal.AfastandaccuratepipelineforIonTorrentsequencingdataanalysisusingiPat[J].BmcBioinformatics,2015,16(1):451.