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栀子中京尼平苷提取方法考察
【摘要】目的建立栀子中京尼平苷的含量测定方法，在此基础上考察栀子中京尼平苷的提取方案。方法高效液相色谱法测定含量，采用KromasilC18色谱柱，流动相为乙腈-水；流速为ml/min；检测波长为nm。栀子粉末先醋酸乙酯回流提取，滤渣再用80%乙醇回流，考察提取效率及京尼平苷纯度。结果京尼平苷在～200μg/ml范围内呈良好线性关系，r=8。用乙醇回流的提取方式可使京尼平苷提取较完全，醋酸乙酯提取所得京尼平苷纯度较高。结论提取溶剂的种类对栀子中京尼平苷的提取效率及纯度有较大影响，先醋酸乙酯再乙醇的提取方法，可以得到部分纯度较高的京尼平苷，且不浪费药材，减少纯化等后续处理的难度。高效液相色谱法检测栀子中京尼平苷，方法快速、准确、可行。【关键词】京尼平苷；提取；测定；纯度；高效液相色谱Abstract：ObjectiveTodevelopanHPLCmethodforthedeterminationofgeniposidefromgardenia.MethodsHighperformanceliquidchromatographywasusedonODSC18withacetonitrile-water(15∶85)asamobilephase.Theflowratewasml/detectionwavelengthwasFirstacircumfluencewasmadebyethyl,theresiduewasextracedby80%ethanol.ThentherateandpurityofGeniposideextractedviadifferentextractionsolventandextractionmethod.ResultsThelinearrangeofgeniposidewas～200μg/ml,r=8.TheextractionmethodofethanolcouldgetahigherextractionrateofGeniposide,andahighpuritywithethylacetateinstead.ConclusionThetypeofsolventintheextractionofGeniposidefromGardeniaaffectstheefficiencyofextractionsignificantly.Makeasequentialextractionbyusingethylfirstandthentheethanol,wecannotonlygettheGeniposideinahighpurity,butalsowastelittleherbs.DeterminationofGeniposideinGardeniacanbedonefastandexactlybyHPLC.Keywords：Geniposide;Extraction;Determination;Purity;HPLC栀子为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果实。据2005版《中国药典》Ⅰ部记载,其具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒的功效，主治热病心烦，黄疸尿赤，血淋涩痛，目赤肿痛，火毒疮疡，扭挫伤痛，是一味临床常用的中药。近年研究表明，京尼平苷是主要有效成分之一［1］，其提取方法众多［2］。本文运用高效液相色谱法［3～5］建立京尼平苷含量测定方法，并在此基础上考察特定需要条件下京尼平苷的提取方式［6］，以便摸索出可行的提取工艺。1仪器与试药1仪器RE-52型旋转蒸发仪，DL-5型大容量离心机，TGL-16H高速离心机，contrifuge电热恒温水浴锅，SB3200超声提取器，ZK-82B型真空干燥箱，XW-80A旋涡混合器；高效液相色谱仪系统：Agilent1100型高效液相色谱仪。2试药栀子，京尼平苷对照品，甲醇(分析纯)、乙腈，醋酸乙酯，双蒸水。2方法与结果HPLC分析方法的建立京尼平苷溶液制备样品溶液：取栀子药材粗粉末约g，精密称定，置25ml具塞容量瓶中，加入甲醇20ml，定容后密塞称重，静置10min后超声处理20min，放冷称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，量取上清液待测。标准品溶液:精密称取京尼平苷标准品适量，加甲醇配成100μg/ml的溶液。色谱条件色谱柱为KromasilC18柱，流动相为乙腈-水；流速ml/min；进样量10μl；检测波长nm；柱温25℃，按外标法进行定量分析。系统适用性按照“”项下色谱条件分析京尼平苷对照品溶液及栀子药材样品溶液，色谱图如图1～2所示。理论塔板数以京尼平苷计为12000,拖尾因子在～范围内,分离度大于，未见样品中其他组分干扰京尼平苷的测定。标准曲线取京尼平苷标准品溶液,进行倍比稀