DNA和RNA提取方法及原理优质PPT课件.ppt

DNA和RNA提取方法及原理第二部分：DNA提取常见问题分析及对策DNA提取原则DNA提取的几种方法DNA提取的几种方法基因组DNA－CTAB法CTAB提取缓冲液的经典配方CTAB法流程图SDS法原理SDS法流程图（以动物组织为例）基因组DNA－其它方法基因组DNA－其它方法基因组DNA－其它方法质粒DNA－碱裂解法质粒DNA－碱裂解法质粒DNA－煮沸法细胞器DNA－差速离心法第一部分：DNA提取方法简介DNA提取的基本步骤材料准备细胞裂解核酸分离、纯化核酸分离、纯化多糖的去除：

高盐法：用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入1/2体积的5MNaCl，高盐可溶解多糖。

用多糖水解酶将多糖降解。

在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖。

用PEG8000代替乙醇沉淀DNA：在500μLDNA液中加入200μl20%PEG8000(含1.2MNaCl)，冰浴20min。多酚的去除：

在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：β-巯基乙醇、抗坏血酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇等

加入易与酚类结合的试剂：如PVP、PEG(聚乙二醇)，它们与酚类有较强的亲和力，可防止酚类与DNA的结合核酸沉淀、溶解基因组DNA的检测

RNA的沉淀和溶解RNA的检测