DNA和RNA提取原理和方法.ppt

DNA和RNA提取原理和方法第一部分：DNA提取方法简介核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。

第一部分：DNA提取方法简介DNA提取的几种方法DNA提取的几种方法基因组DNA－CTAB法大家应该也有点累了，稍作休息CTAB提取缓冲液的经典配方褐变CTAB提取缓冲液的改进配方PVP（聚乙烯吡咯烷酮）CTAB法流程图SDS法原理SDS法流程图（以动物组织为例）基因组DNA－其它方法基因组DNA－其它方法基因组DNA－其它方法质粒DNA－碱裂解法质粒DNA－碱裂解法SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用质粒DNA－煮沸法细胞器DNA－差速离心法第一部分：DNA提取方法简介DNA提取的基本步骤材料准备严谨性质粒和松弛性质粒细胞裂解核酸分离、纯化核酸分离、纯化多糖的去除：

高盐法：用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入1/2体积的5MNaCl，高盐可溶解多糖。

用多糖水解酶将多糖降解。

在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖。

用PEG8000代替乙醇沉淀DNA：在500μLDNA液中加入200μl20%PEG8000(含1.2MNaCl)，冰浴20min。多酚的去除：

在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：β-巯基乙醇、抗坏血酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇等

加入易与酚类结合的试剂：如PVP、PEG(聚乙二醇)，它们与酚类有较强的亲和力，可防止酚类与DNA的结合核酸沉淀、溶解

猕猴桃DNA提取实例猕猴桃基因组DNA40第一部分：DNA提取方法简介RNA提取的通用方法异硫氰酸胍/苯酚法影响RNA提取的因素影响RNA提取的因素第一部分：DNA提取方法简介RNA提取常见问题

RT常见问题分析和解决方案RT常见问题分析和解决方案RT常见问题分析和解决方案