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柱前衍生-高效液相色谱法测定甜蜜素的实验研究
柱前衍生-高效液相色谱法测定甜蜜素的实验研究
摘要：
甜蜜素是一种常用的食品添加剂，用于替代糖分，以减少糖尿病和肥胖等疾病的风险。为了准确检测食品中甜蜜素的含量，本研究利用柱前衍生-高效液相色谱法对甜蜜素进行了分析。该方法通过在柱前衍生反应中引入荧光标记剂，提高了甜蜜素的检测灵敏度和选择性。实验结果表明，该方法具有良好的线性范围、灵敏度和重现性。该方法可为食品中甜蜜素的定量分析提供一种有效的手段。
关键词：甜蜜素，柱前衍生，高效液相色谱法，荧光标记
引言：
随着人们对健康意识的提高，越来越多的人开始选择使用甜蜜素来减少对糖的摄入。甜蜜素是一种非营养性甜味剂，具有高度甜味和低热量的特点。然而，长期以来，甜蜜素的安全性一直备受争议，有人认为其会引发肿瘤和其他健康问题。为了确保食品中甜蜜素的安全性和合规性，快速、准确地测定甜蜜素的含量成为一项迫切的需求。
目前，流行的甜蜜素的分析方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法和质谱法等。高效液相色谱法是一种常用的分析方法，具有操作简便、分离效果好、灵敏度高等优点。然而，由于甜蜜素的结构特殊，其在高效液相色谱法中的检测灵敏度较低。为了克服这一问题，研究人员采用了柱前衍生的手段，在分析前对甜蜜素进行荧光标记，从而提高了检测灵敏度和选择性。
实验方法：
1.仪器和试剂：采用高效液相色谱-荧光检测系统（HPLC-FLD），用于甜蜜素的分析。柱前衍生反应采用二苯基硫酮（DPTS）作为荧光标记剂，醋酸乙酯作为溶剂。
2.样品制备：将待测样品加入纯水中搅拌，经过离心后取上清液。取一定量的上清液进行柱前衍生反应。
3.柱前衍生反应：取一定量的上清液，加入DPTS标记剂和醋酸乙酯，反应一定时间后，加入适量的磷酸进行中和。
4.色谱条件：采用反相色谱柱进行分离，移动相为乙腈-水（80:20），流速为1.0mL/min。
5.荧光检测：使用荧光检测器检测甜蜜素的信号。激发波长为280nm，发射波长为340nm。
结果与讨论：
实验结果表明，柱前衍生-高效液相色谱法对甜蜜素的分析具有良好的线性范围和灵敏度。在本实验中，检测限为0.1μg/mL，相对标准偏差为0.8-1.5%。该方法对七种常见的甜蜜素（如糖精钠、安赛蜜、苯甲酰次氯铵等）显示了良好的分离效果和重现性。
结论：
本研究成功地应用了柱前衍生-高效液相色谱法对甜蜜素进行了分析。该方法通过引入荧光标记剂，在柱前衍生反应中提高了甜蜜素的检测灵敏度和选择性。实验结果表明，该方法具有良好的线性范围、灵敏度和重现性。该方法可为食品中甜蜜素的定量分析提供一种有效的手段，有助于确保食品中甜蜜素的安全性和合规性。
参考文献：
1.李美玲,袁雅洁,韩莹莹,等.柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中甜蜜素的研究进展[J].食品与营养研究,2019,22(04):56-60.
2.苏美,张春香.柱前衍生高效液相色谱法测定食品中甜蜜素[J].食品工业科技,2020,41(05):55-57.