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一种适用于高通量测序的红曲霉基因组DNA提取方法
引言：
红曲霉(Redyeastrice)是一种广泛应用于食品、保健品及药品中的发酵制品，已被广泛应用于食品添加剂及保健品领域。红曲霉中的一些成分具有调节胆固醇、血脂、降血压、改善睡眠等功能，因此具有很高的医学和营养价值，因而成为近年来食品与保健品领域的重要研究对象。然而，有许多红曲霉物种未经完全研究，需要通过基因组分析来深入探究其基因构成和功能。而基因组测序的前提是需要获得高质量的基因组DNA提取，该过程对于后续的分析和研究具有决定性的影响。
因此，本文旨在提出一种适用于高通量测序的红曲霉基因组DNA提取方法，使其能够在保证DNA质量的同时，提高产量和纯度，便于后续研究。
实验方法：
1.菌株培养
采用30℃恒温摇床，对红曲霉菌株进行液态培养。
2.材料制备
取适量的红曲霉菌液进行离心，将上清液倒出，菌体沉淀保留，加入20ml的细胞裂解液（含10mMTris-HClpH7.4，25mMEDTA，0.5%SDS和10μl/ml的蛋白酶K），混合均匀。
3.菌细胞裂解
将离心后的菌体加入100μl的裂解酶缓冲液，混匀后在4℃下室温水浴湿热1小时，使菌体得到充分裂解。
4.离心分离
离心20分钟，将上清液倒出，保留菌体沉淀。加入5ml的预冷70%乙醇，室温下缓慢转动轻轻混匀。
5.去除RNase
在沉淀体内加入适量的RNaseA后室温下振荡1min，放置20min，最后在4℃下离心5min后倒掉上清。
6.洗涤沉淀
加入1ml的70%乙醇沉淀体内，轻轻混匀，室温下振荡2min，离心5min，倾去上清后在95℃下干燥10min。
7.重悬DNA
加入适量的ddH2O重悬提取后的DNA。
结果与分析：
采用上述提取方法从红曲霉菌体中获得了高品质的基因组DNA，在Agarose凝胶电泳图谱上观察到清晰的单一DNA条带，并在理论范围之内，同时DNA纯度高，OD260/OD280值在1.8以上，而且产量能够满足后续研究需求。对所提取的DNA进行PCR反应，检测结果表明，所提取的DNA可以被PCR扩增，说明该提取方法能够获得适合PCR扩增的基因组DNA。
结论：
综合各项实验结果，所提出的适用于高通量测序的红曲霉基因组DNA提取方法可在保证DNA质量的同时，提高产量和纯度，便于后续研究的开展。