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等温双链核酸扩增检测新技术研究综述报告
随着新冠疫情的肆虐，病毒检测成为了疫情防控的重要手段。传统的PCR检测方法虽然具有高灵敏度和特异性，但其需要昂贵设备、专业技术和时间耗费长等缺点成为了制约其应用的因素。因此，新技术的研究和应用成为了疫情防控中的重要问题。等温双链核酸扩增（loop-mediatedisothermalamplification，LAMP）检测技术因其具有快速和便携等优势，成为了近年来受到广泛关注的检测技术之一。
一、等温技术原理及特点
LAMP技术是一种可以在等温条件下特异性扩增目标DNA序列的技术，它是由EikenChemicalCo.Ltd公司于2000年首次提出的，该技术被认为是PCR技术的一种有效补充。LAMP技术与PCR技术相比，有以下的优势：（1）基于异二聚酶酶（Bst）酶的酶切扩增技术，采用等温条件进行反应，不需要复杂的仪器和耗时的程序；（2）具有高度的特异性，可扩增极少含量的DNA片段；（3）反应时间快，通常只需要30分钟左右，非常适合于快速检测。
在LAMP技术中，利用三个至六个特异性引物，通过异二聚酶酶（Bst）荧光酶和DNA聚合酶等酶系统，在恒定的温度下扩增靶标DNA序列。由于等温条件下的酶反应，LAMP技术不需要冷热循环步骤，可在简单的反应容器中进行扩增，并且反应温度在60摄氏度到68摄氏度之间。因此，该技术可以在便携式有源设备上进行，不需要复杂的实验室，这为其应用于移动设备，如手提式核酸检测仪等提供了条件。
二、LAMP技术在病毒检测中的应用
1.感染性单核细胞增多症病毒（EBV）检测
EBV是一种广泛存在于人类中的病毒，可引起感染性单核细胞增多症等疾病。LAMP技术对EBV的检测效率优于PCR技术，特异性较高，并且反应时间短。Yeh等人使用LAMP技术，能够在55摄氏度下检测由UV灭活的EBV样品，同时也能够在亚临界DNA浓度下检测出EBV的TaqmanPCR技术无法检测的阳性结果。
2.新型冠状病毒（SARS-CoV-2）检测
在新型冠状病毒疫情爆发后，快速、灵敏的检测成为了家喻户晓的话题。为了实现对疫情的快速监控，各国科学家和医学工作者正在研究各种型号的检测技术。日本研究团队提出了一种可以在1小时内检测新型冠状病毒的LAMP技术，该方法特异性高、敏感性好，并且操作简单。同时，该技术还具有一定的处理细菌污染能力，有效降低了反应器中细菌污染对检测的影响，共计检测了200多个病例，成功扩增目标序列。
3.寨卡病毒检测
LAMP技术也被用于在血清、唾液和尿液等多种样本中检测寨卡病毒。Pelchat等人使用LAMP技术成功地开发了一种便携式的LAMP硬件设备，可以快速、准确地检测寨卡病毒，并可在非常阳光下进行操作。此外，Jang等人开发的一种新型LAMP技术，可以比传统PCR方法更准确、更快速地检测寨卡病毒，这将有助于防止疫情的进一步蔓延。
三、结论
近年来，LAMP技术在病毒检测等领域得到了广泛应用，该技术具有快速、灵敏、特异和低成本等优点。此外，LAMP技术的特点决定了其在移动设备上的应用潜力，如在荒地、山区、农村地区或者发展中国家的偏远地区中的使用。虽然LAMP技术还需要在精度、可重复性和多样性等方面进行进一步评估，但对于疫情防控的快速响应和现场检测的需要，LAMP技术将为病毒检测提供有力支持。