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磁性琼脂糖微球固定化猪肺血管紧张素转化酶分离长蛇鲻降血压肽的研究 Introduction: 肺利素是一种存在于长蛇鲻中的多肽,具有显著的降血压作用。然而,纯化长蛇鲻降血压肽具有很大的难度和高昂的费用。为了克服这个问题,本研究采用磁性琼脂糖微球固定化猪肺血管紧张素转化酶(ACE),以分离长蛇鲻降血压肽。 MaterialsandMethods: 磁性琼脂糖微球制备:以琼脂糖为基础原料,利用离子凝胶法制备磁性琼脂糖微球。在此过程中,添加的磁性钙铁氧体磁性粉末能够使得琼脂糖微球与外界形成磁场交互作用。随后的magneticseparation可以方便地将这些微球从反应体系中分离出来。 猪肺ACE的固定化:将猪肺ACE与磁性琼脂糖微球混合并保持一定的反应时间,使得ACE分子与微球表面上的羧甲基相互结合,从而在微球内形成一层稳定的附着酶。之后,通过magneticseparation方法将未结合的磁性琼脂糖微球分离出去,得到固定化ACE的磁性琼脂糖微球。 实验流程: 1.将长蛇鲻降血压肽与磁性琼脂糖微球固定化的猪肺ACE反应。 2.分离未反应的长蛇鲻降血压肽和磁性琼脂糖微球。 3.通过magneticseparation方法将固定化ACE的微球从反应体系中分离出来。 4.用酸性溶液(如乙酸或盐酸)将长蛇鲻降血压肽从microspheres上解离。 5.通过HPLC、ELISA、对流层析等检测方法对分离得到的长蛇鲻降血压肽进行鉴定和分析。 Result: 实验结果表明,通过磁性琼脂糖微球固定化猪肺ACE的方法,可以方便、快速地分离出长蛇鲻降血压肽。在磁力作用下,微球可以有效地分离出体系中的杂质和固定化酶,对降低实验的浓度非常有利。ELISA实验进一步验证了所分离得到的长蛇鲻降血压肽具有明显的生物活性。 Discussion: 本研究的研究方法简单、高效,可以显著提高分析物的纯度和分离效率。本实验将猪肺ACE和长蛇鲻降压多肽结合起来,实现了良好的固定效果,并以此为基础,成功地将目标多肽分离纯化出来。 Conclusion: 本研究证明了磁性琼脂糖微球固定化猪肺ACE可以用于从长蛇鲻中分离出长蛇鲻降血压肽的方法,具有分离效率高、手续简单、操作方便等优点。因此,这种方法有望用于分离其它类似多肽物质的纯化和鉴定,为研究最新药物提供了新的思路和方法。