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猪肺血管紧张素转化酶的分离纯化及性质研究的开题报告
一、选题背景
血管紧张素转化酶（angiotensinconvertingenzyme,ACE）是一种重要的酶，在肺血管紧张素系统和肾素-血管紧张素系统中起着重要的生理和病理作用。近年来，研究人员发现ACE在多种疾病中的作用，如高血压、心衰、肾病、糖尿病等，因此对ACE进行研究已成为当前生命科学领域的热点。
猪肺是一种常用的ACE来源，其ACE性质和人类非常相似，且获得较为方便。因此，对猪肺ACE的研究对于了解ACE的生理和病理机制有着重要意义。
二、研究内容
本研究旨在对猪肺ACE进行分离纯化及性质研究。具体研究内容如下：
1.猪肺ACE的提取：将鲜猪肺粉碎后用生理盐水进行提取，得到猪肺ACE提取物。
2.分离纯化：采用硫酸铵分级沉淀、DEAE纤维素柱层析和四羧酸葡萄糖凝胶柱层析等方法进行猪肺ACE的分离纯化。
3.酶活力分析：利用菲尔林-佩奥曼反应法对猪肺ACE的酶活进行测定，并确定其动力学参数。
4.酶学性质研究：对猪肺ACE的pH值、温度、金属离子和抑制剂等影响因素进行研究。
5.蛋白质组学分析：对猪肺ACE分子量、氨基酸序列及其与其他物质间的相互作用进行研究。
三、预期贡献
本研究将对猪肺ACE的分离纯化及性质进行全面深入地研究，有望揭示ACE在生理和病理过程中的重要作用，为疾病的预防和治疗提供理论依据和技术支持。同时，本研究还可为ACE相关药物研发提供重要参考。
四、研究方法
1.实验仪器：超声细胞破碎仪、制备电泳仪、反渗透仪、玻璃酸素熔炉、UV可见光谱仪、荧光光谱仪等。
2.实验试剂：生理盐水、PMSF、硫酸铵、DEAE纤维素、四羧酸葡萄糖等。
3.实验步骤：
（1）鲜猪肺制备ACE提取物；
（2）用硫酸铵分级沉淀、DEAE纤维素柱层析和四羧酸葡萄糖凝胶柱层析等方法进行猪肺ACE的分离纯化；
（3）采用菲尔林-佩奥曼反应法对猪肺ACE的酶活进行测定，并分析其动力学参数；
（4）对猪肺ACE的pH值、温度、金属离子和抑制剂等影响因素进行研究；
（5）对猪肺ACE分子量、氨基酸序列及其与其他物质间的相互作用进行蛋白质组学分析。
五、研究进度安排
1.第一年（2021年）：制备猪肺ACE提取物，初步分离ACE并测定其酶活。
2.第二年（2022年）：进行ACE的纯化及其酶动力学参数研究。
3.第三年（2023年）：进行ACE的酶学性质和蛋白质组学分析。
六、研究预期成果
1.全面深入地研究猪肺ACE的酶学性质和功能。
2.揭示ACE在生理和病理过程中的重要作用，为疾病的预防和治疗提供理论依据和技术支持。
3.为ACE相关药物研发提供重要参考。
4.发表相关学术论文，提升学术水平及科研能力。