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体外诱导骨髓源间充质干细胞分化为胰岛样结构的初步探讨 随着全球糖尿病患病人数的不断增加,胰岛素的需求量也日益增加。而当前主要的治疗方法仍然是胰岛素注射或输注,存在很多的问题,如注射频繁、精确剂量控制不易实现、高昂的药物费用等等。因此,寻找新的治疗方法就显得非常必要。 骨髓间质干细胞(BM-MSCs)以其丰富的分泌蛋白质、能够抑制免疫炎症反应等作用,成为了组织工程学中重要的资源。同时研究人员也发现,BM-MSCs能够分化为多种细胞类型,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。由此引发了一个新的研究方向,能否将BM-MSCs诱导分化为胰岛细胞,从而实现治愈糖尿病的目标呢? 研究方法: 在实验室中,我们通过一系列的培养、诱导实验,探讨了体外诱导BM-MSCs分化为胰岛样细胞的可能性。 一、BM-MSCs的培养 我们首先通过特定的培养底物在体外进行BM-MSCs的培养。BM-MSCs是一种纤维状细胞,贴附的效应并不好。因此我们在培养底物中加入了一种胶原酶来可靠地剪断玻璃片表面的胶原结构,使得BM-MSCs可以贴附地更牢固。 二、胰岛样细胞的诱导 诱导BM-MSCs分化为胰岛样细胞是本研究的核心。我们选用了一种由高渗盐溶液和葡萄糖溶液组成的混合液作为诱导剂,同时添加一定的生长因子,如胰岛素生长因子I和II(IGF-I和IGF-II)、转化生长因子β(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF)等,来为其提供分化所需的条件。 经过几轮细胞培养和诱导实验后,我们观察到细胞的形态发生了明显的改变。细胞体积逐渐变大,细胞核开始逐渐缩小。同时,细胞的染色性质也发生了相应的变化,呈现出典型的胰岛细胞染色形态。 三、胰岛样细胞的功能分析 在观察到BM-MSCs能够成功诱导分化为胰岛样细胞之后,我们进行了多项功能性实验,以确定这些细胞的真正功能特性。其中,最关键的是检测是否具备胰岛细胞的分泌胰岛素的能力。我们在试管内添加一些葡萄糖刺激细胞,然后检测培养液中胰岛素的含量。 实验结果表明,我们成功诱导BM-MSCs分化为胰岛样细胞,并具备胰岛素分泌的能力。BM-MSCs所分泌的胰岛素日益增多,与正常胰岛素分泌一致。这为将来用于治疗糖尿病提供了很大的可能性。 结论: 在本次研究中,我们首次证实体外诱导BM-MSCs分化为胰岛样细胞的可行性及其功能性。虽然这里我们为了方便,仅使用了一系列的体外培养、诱导实验,但是要想将其真正应用到治疗实践中,我们还需要进行临床实验,以确定其真正的应用前景。 参考文献: 1.Dominici,M.,LeBlanc,K.,Mueller,I.,Slaper-Cortenbach,I.,Marini,F.,Krause,D.andHorwitz,E.(2006).Minimalcriteriafordefiningmultipotentmesenchymalstromalcells.TheInternationalSocietyforCellularTherapypositionstatement.Cytotherapy,8(4):315-317. 2.Park,K.S.etal.(2012).Invitroandinvivoanalysesofhumanembryonicstemcell-derivedpancreaticprogenitorsMethodsMolBiol,873:239–251.