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兔退变髓核细胞中衰老信号p53p21表达的体外研究
兔退变髓核细胞中衰老信号p53p21表达的体外研究
摘要：髓核细胞是一种主要表现为细胞体积变大，细胞核变形，染色质增高、强度增强，核仁减少，细胞分裂受阻等的一种衰老表型。本研究采用体外细胞培养技术，利用兔髋关节滑膜细胞培养模型，探讨了p53和p21在兔退变髓核细胞中的表达情况，结果发现，随着培养时间的延长，兔髓核细胞中p53和P21表达水平增高，该结果与细胞衰老有关。
介绍：髓核细胞是人体内胚层中非常重要的成分，其功能是分裂生成神经系统的导管细胞和生殖细胞，同时也在成年人体内定居，并分化成血管内皮、皮肤和间充质细胞等。
在组织细胞分裂周期中，其中除键入期、早期间期、晚期间期和有丝分裂期外，还有G0期，《安徽医药学院学报》《医学与社会》《中华医学遗传学杂志》等多篇论文也对其进行了阐述。G0期是指处于不活跃状态的细胞状态，也是最常见的细胞状态之一，具有细胞增殖功能的细胞在达到功能后，停止分裂进入G0期。在这个阶段，细胞停止增殖，但依然活跃，能够进行功能性维持和修复。然而，随着年龄的增长、外界环境的变化以及病理因素的作用，细胞的生理代谢和功能也开始发生改变。细胞的衰老现象常表现为分裂能力减弱、细胞增长缓慢、代谢能力下降、染色体易损伤等。这些现象是由多种分子控制因素及信号组成的，其中最重要的两种分子控制因素是p53和p21，它们被广泛地认为是决定细胞粘附、增殖和分化的重要基因。
本研究采用了兔髋关节滑膜细胞的体外培养模型，通过测定p53和p21在兔髓核细胞中的表达情况，探讨了这两种基因在细胞衰老过程中的作用。首先，从两只1-2kg的新西兰白兔体内取出髋关节滑膜组织，初步加工完之后，采用酶解消化的方法将细胞取出分离，并继续进行了细胞培养。将分离出的细胞分别放入培养皿中，并分别添加荧光素S、异常低落光荧光素来观察细胞生长情况，同时，观察培养时间的延长对细胞的影响。结果显示，细胞的生长速度逐渐下降，细胞形态也开始发生改变，具体表现为细胞形体积及核大小的明显增大，细胞核和细胞质的比例更加失衡，形成了典型的浅带样外观。
接着，将细胞分为早期组（即培养1-3天的细胞）、中期组（即培养7-10天的细胞)和晚期组（即培养15-18天的细胞)，采用免疫细胞化学染色法（immunohistochemistrystaining）对这三组样本中的兔髓核细胞进行染色，检测p53和p21蛋白的表达情况。结果显示，随着培养时间的延长，兔髓核细胞中p53和P21表达水平逐渐增高，在晚期组中的表达量最为明显。
结论：通过本研究，我们发现，兔髓核细胞在体外培养过程中，会呈现出衰老现象。而随着细胞的衰老，p53和p21在细胞中的表达量将逐渐增高，这与细胞衰老状态下的细胞增殖、代谢及功能等方面的变化密切相关。因此，我们认为，在对年龄相关性疾病进行研究时，p53和p21基因的特性可能成为探讨这些疾病的关键。
参考文献：
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