P210T315I--BCRABL转基因小鼠模型的建立与鉴定.docx

P210T315I--BCRABL转基因小鼠模型的建立与鉴定
引言
Phildelphia（Ph）染色体阳性慢性髓性白血病(CML)是一种以BCR-ABL融合基因为特征的肿瘤性疾病，其发生与慢性期、加速期及末期(或称为爆发性期)的演变过程密切相关。目前，针对BCR-ABL融合基因的靶向治疗药物得到广泛研究和应用，令CML的临床疗效显著提高。然而，病理机制的进一步研究，特别是BCR-ABL在CML发生进程中的作用和调控机制，仍需要研究工具来深入探究。
本研究目的是建立和鉴定BCR-ABL转基因小鼠模型，以探究BCR-ABL融合基因在CML发生及其演变过程中的生物学功能和作用机制，为CML的发生及其治疗提供科学依据。
材料与方法
建立BCR-ABL转基因小鼠模型
采用P210T315I-BCR-ABL融合基因进行构建。首先，将P210T315I-BCR-ABL转基因导入C57BL/6J小鼠受精卵中，获得F0代转基因小鼠。接着，对F0代转基因小鼠进行筛选、培育，获得F1代转基因小鼠。最后，选取F1代转基因小鼠进行遗传鉴定。
遗传鉴定
采用PCR扩增P210T315I-BCR-ABL融合基因，并进行DNA测序。
鉴定BCR-ABL转基因小鼠模型的建立
观察各代转基因小鼠的外在表型表现、体重变化、周围血象、髓细胞象、骨髓病理学检查等指标。
结果
BCR-ABL转基因小鼠模型的建立
通过利用P210T315I-BCR-ABL融合基因对C57BL/6J小鼠进行导入，获得了F0代转基因小鼠。经过筛选、培育，获得F1代转基因小鼠。通过PCR扩增和DNA测序，证明F1代小鼠中成功构建了P210T315I-BCR-ABL转基因。
鉴定BCR-ABL转基因小鼠模型的建立
观察到BCR-ABL转基因小鼠模型F1代小鼠在外在表现、体重变化、周围血象、髓细胞象、骨髓病理学检查等指标方面均与野生型小鼠有明显差异。转基因小鼠在周围血象中的白细胞计数较野生型小鼠高，且死亡率增加。骨髓检查显示转基因小鼠有排列紊乱的细胞，而野生型小鼠则无。
讨论
本研究成功构建了P210T315I-BCR-ABL转基因小鼠模型，并对其进行了鉴定。结果表明，转基因小鼠模型在各项指标上与野生型小鼠存在明显差异，特别是在周围血象和骨髓病理学检查方面表现出明显的CML病变特征。
BCR-ABL融合基因在CML的发生和演变中发挥着重要的作用，该转基因小鼠模型的建立可为深入探究BCR-ABL的生物学功能和作用机制提供有效的实验手段。在进一步研究中，可以通过利用该模型对BCR-ABL靶向治疗药物的疗效进行评价和探究，为临床治疗提供指导和依据。
结论
本研究成功建立了P210T315I-BCR-ABL转基因小鼠模型，该模型具有较好的生物学特征和CML病变表现，为进一步探究BCR-ABL的生物学功能和作用机制提供了实验手段。通过该模型的应用，可以为CML的发生及其治疗提供科学依据。