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P210T315I--BCRABL转基因小鼠模型的建立与鉴定的中期报告
研究背景：
慢性髓细胞性白血病（CML）是一种恶性肿瘤性疾病，其主要特征是BCR-ABL转录物的产生。BCR-ABL融合基因是由Ph染色体上BCR和ABL两个基因融合而成的。BCR-ABL合成蛋白是一个酪氨酸激酶，在细胞的增殖和生存中发挥重要作用。因此，BCR-ABL融合基因在CML的发病和进展中扮演了关键性角色。因此，建立BCR-ABL转基因小鼠模型有助于深入研究CML的发病机制以及开发新的治疗方法。
研究目的：
本研究旨在建立和鉴定P210T315I-BCRABL转基因小鼠模型，并探索其在CML发病机制和治疗中的应用。
研究方法：
1.构建P210T315I-BCRABL表达质粒：将P210T315I-BCRABL序列克隆到表达质粒中。
2.体外培养细胞系：使用脾细胞分离和培养来自P210T315I-BCRABL转基因小鼠的脾细胞。
3.体内实验：将P210T315I-BCRABL转基因小鼠脾细胞移植到野生型小鼠的腹膜腔中，观察是否会形成肿瘤和白血病。
4.分子生物学鉴定：使用PCR、Westernblot和免疫组化等技术鉴定P210T315I-BCRABL表达，以及白血病细胞的分化状态、增殖和凋亡等。
研究结果：
1.成功构建了P210T315I-BCRABL表达质粒。
2.成功从P210T315I-BCRABL转基因小鼠脾脏中分离和培养了脾细胞系，同时证实了其呈现白血病细胞特征。
3.将转基因小鼠脾细胞移植到野生型小鼠腹膜腔中后，观察到移植物形成了白血病细胞克隆，并且对野生型小鼠产生了广泛的浸润和转移。
4.利用PCR、Westernblot和免疫组化等技术对移植物中的白血病细胞进行了鉴定，同时对其增殖、分化和凋亡等问题进行了深入研究。
研究结论：
本研究成功建立了P210T315I-BCRABL转基因小鼠模型，并鉴定了其移植物形成的白血病细胞具有CML特征。该模型为CML发病机制和治疗研究提供了重要的实验平台。