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小鼠胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达的影响
小鼠胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达的影响
摘要：
胚胎冷冻和解冻技术被广泛应用于动物繁殖和保护。然而，胚胎冷冻过程中液态氮的使用可能导致胚胎的玻璃化冷冻。本研究旨在探究小鼠胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达的影响。我们发现，小鼠胚胎玻璃化冷冻会降低胚胎的存活率和孕率，并导致子代发育异常。胚胎印记基因的表达模式也在玻璃化冷冻组和对照组之间存在差异。进一步的研究表明，玻璃化冷冻可能通过影响DNA甲基化动态调控胚胎基因表达，从而影响子代发育和胚胎印记基因表达。这些发现提示胚胎玻璃化冷冻可能对动物繁殖和保护产生负面影响。
1.引言
2.背景
3.材料与方法
3.1小鼠玻璃化冷冻模型
3.2胚胎存活率和孕率的检测
3.3子代发育异常的观察
3.4胚胎印记基因表达的检测
3.5DNA甲基化水平的检测
4.结果
4.1玻璃化冷冻胚胎的存活率和孕率降低
4.2玻璃化冷冻胚胎子代发育异常
4.3玻璃化冷冻胚胎胚胎印记基因表达差异
4.4玻璃化冷冻胚胎的DNA甲基化水平变化
5.讨论
6.结论
7.参考文献
1.引言
胚胎冷冻和解冻技术是一项广泛应用于动物繁殖和保护的技术。这项技术通过将动物胚胎或胚胎细胞在液态氮中冷冻保存，以便在需要时进行解冻和使用。然而，胚胎冷冻过程中液态氮的使用可能导致胚胎的玻璃化冷冻，这可能对胚胎的存活和发育产生负面影响。因此，我们需要进一步探究胚胎玻璃化冷冻对动物子代发育和胚胎印记基因表达的影响。
2.背景
胚胎印记基因在胚胎发育和种系遗传中起着重要作用。这些基因的表达模式受到DNA甲基化的调控。研究表明，胚胎冷冻过程中液态氮的使用可能会引起DNA甲基化的异常，进而影响胚胎印记基因的表达。因此，胚胎玻璃化冷冻可能会对子代发育和胚胎印记基因表达产生影响。
3.材料与方法
3.1小鼠玻璃化冷冻模型
通过将小鼠胚胎置于液态氮中进行冷冻，并在需要时解冻和使用。使用玻璃化冷冻的胚胎作为实验组，未进行玻璃化冷冻的胚胎作为对照组。
3.2胚胎存活率和孕率的检测
检测玻璃化冷冻胚胎的存活率和孕率，以评估其对子代发育的影响。
3.3子代发育异常的观察
观察子代发育过程中是否存在异常现象，如胚胎死亡、胚胎发育延迟等。
3.4胚胎印记基因表达的检测
通过实时荧光定量PCR等技术检测胚胎印记基因的表达水平，并与对照组进行比较。
3.5DNA甲基化水平的检测
通过甲基化特异性PCR或甲基化芯片等技术检测胚胎DNA的甲基化水平，并分析其与胚胎印记基因表达之间的关系。
4.结果
4.1玻璃化冷冻胚胎的存活率和孕率降低
玻璃化冷冻胚胎的存活率和孕率较对照组明显降低，表明玻璃化冷冻对胚胎存活和发育产生了负面影响。
4.2玻璃化冷冻胚胎子代发育异常
玻璃化冷冻胚胎的子代发育过程中出现了一些异常现象，如胚胎死亡、胚胎发育延迟等。
4.3玻璃化冷冻胚胎胚胎印记基因表达差异
玻璃化冷冻胚胎和对照组的胚胎印记基因表达模式存在差异。部分印记基因的表达水平明显改变。
4.4玻璃化冷冻胚胎的DNA甲基化水平变化
玻璃化冷冻胚胎的DNA甲基化水平与对照组存在明显差异，提示玻璃化冷冻可能通过影响DNA甲基化动态调控胚胎基因表达。
5.讨论
通过实验结果可以看出，胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达产生了明显的影响。这可能是由于玻璃化冷冻过程中液态氮对胚胎的损伤导致的。此外，胚胎玻璃化冷冻也可能通过影响DNA甲基化动态调控胚胎基因表达，从而影响子代发育和胚胎印记基因表达。
6.结论
胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达产生了明显的负面影响。这些发现提示在胚胎冷冻和解冻过程中需谨慎操作，以减少玻璃化冷冻对胚胎的损伤。此外，进一步研究胚胎玻璃化冷冻对其他动物物种的影响也十分重要。
参考文献：
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[3]JangG,etal.TheinfluenceofvitrificationonNeurog1geneexpressionintheembryonicbrainofmiceoffspring.Cryobiology.2019,86:97-103.